研究目的:　　 通过构建稳定的小细胞肺癌原位瘤裸鼠模型,比较其与皮下瘤病理及影像学表现差异,明确原位瘤生长及转移等特点;初步了解人小细胞肺癌原位瘤肿瘤组织内CD133、MAGE、VEGF等蛋白在肿瘤细胞的表达及分布。　　 研究方法:　　 (1)人小细胞肺癌皮下瘤及原位瘤模型的构建:采用经皮穿刺种植的方法,将人小细胞肺癌NCI-H446细胞悬液种植到实验裸鼠左肺内以及左侧腋部皮下,分别构建人小细胞肺癌原位移植瘤及皮下瘤裸鼠模型。　　 (2)CT及MRI检测荷瘤裸鼠:在模型建立第3周末,对所有实验裸鼠进行胸腹部高分辨率CT及MRI扫描,观察成瘤率、肿瘤大小、坏死及转移等表现。　　 (3)病理检测皮下瘤及原位瘤病理改变及转移特点:待CT及MRI扫描结束后,对成瘤的裸鼠即刻用4%多聚甲醛经心脏全身灌注固定、取出肿瘤,大体检测肿瘤的质地、色泽、形态及淋巴结转移等情况,然后行连续常规切片,HE染色,显微镜下观察肿瘤生长方式(浸润、膨胀)、细胞形态、新生血管、组织坏死及淋巴结转移等。　　 (4)原位瘤组织内蛋白在肿瘤细胞的表达及分布:筛选成瘤的原位瘤模型,待肿瘤生长至所需大小后取出,取肿瘤组织、瘤周组织及正常肺组织各2份,1份常规固定、切片,进行CD133、VEGF、MAGE免疫荧光法染色,用光学显微镜观察蛋白表达阳性细胞在三种组织中的分布情况;另1份组织行Western-blot,检测蛋白表达含量在三种组织中的差异。　　 研究结果:　　 (1)HRCT及MRI扫描结果显示:20只原位瘤模型中16只CT及MRI发现病灶,肿瘤组织呈软组织样密度及信号,成瘤率约85%;20只皮下瘤模型CT及MRI均可见肿瘤组织,成瘤率为100%。皮下瘤组MRI在检测肿瘤坏死特性上具有明显特异性。　　 (2)组织学病理:大体原位瘤呈浸润性生长,纵膈及淋巴结可见多发转移灶;HE染色可见瘤细胞大小形态不等,呈圆形或椭圆形,细胞质稀疏,核浆比倒置明显,裸样核及核分裂象明显,核浓染似墨滴状,核仁不清,组织异型性大,具有小细胞肺癌特点。而皮下瘤模型:大体肿瘤组织呈膨胀性生长,皮下瘤模型肿瘤细胞呈层状分布,可见极性,肿瘤组织呈膨胀性生长,境界清楚,被纤维包膜包绕,肿瘤内发现纤维分割。肿瘤细胞大小较一致,细胞内可见少量细胞质,细胞核明显增大,病理分裂核少见,肿瘤组织内见腺管样结构,具有腺癌特点。　　 (3)CD133、VEGF、MAGE免疫荧光及Western-blot检测显示:CD133、VEGF、MAGE在原位瘤肿瘤组织、瘤周组织及正常肺组织分布具有一定的特异性:CD133蛋白瘤周组织表达水平高于肿瘤组织及肺组织,而肿瘤组织的表达含量高于肺组织;VEGF蛋白在肿瘤组织的表达水平要高于瘤周组织及肺组织,而瘤周组织表达含量要高于肺组织;MAGE蛋白瘤周组织、肿瘤组织表达含量高于肺组织,瘤周组织及肿瘤组织表达量无明显统计学差异;　　 结论:　　 (1)经皮穿刺肺内种植人小细胞肺癌细胞是一种简单易行且成瘤率高的人小细胞肺癌原位移植瘤裸鼠模型的有效构建方法。　　 (2)人小细胞肺癌原位瘤模型较皮下瘤更多地保留了原有组织生物学特性,能更确切地模拟人体内小细胞肺癌生长发展规律,是一种更加稳定可靠的肺癌模型。　　 (3)CD133、VEGF及MAGE作为与小细胞肺癌高度相关的标志物及蛋白,设计针对CD133、VEGF及MAGE的新药及造影剂,有可能为小细胞肺癌免疫显像及靶向治疗方向提供新方向。MAGE在小细胞肺癌中的表达具有高度的特异性和稳定性。　　 (4)作为具有高度侵袭性的肿瘤细胞,小细胞肺癌的增殖及转移具有一定的渐进性及和隐匿性。