论文部分内容阅读
水稻是世界各国特别是亚洲国家的主要粮食作物。稻谷的高产稳产优品质,一直是研究者致力的目标。水稻的抗病虫性、抗逆性和强再生能力、细胞质雄性不育以及功能叶耐衰老、矮秆、早熟、大柱头、大粒等优异特性都是达成该目标不可或缺的保障。挖掘控制这些优异性状的基因应用于水稻育种,是当前解决粮食问题的关键。普通野生稻保存着栽培稻中不具有或者在人工驯化过程中消失掉了的优异基因。本研究旨在筛选普通野生稻所特有的基因,分析其控制的性状,寻找应用于水稻生产的实用价值。
将中国科学院国家基因研究中心克隆并精确测序了的普通野生稻材料(O.rufipogon)W1943全长cDNA克隆分别与NCBI数据库中典型粳稻日本晴和典型籼稻93-11的cDNA克隆序列进行比对,搜集到了67段W1943具有而日本晴和93-11中无任何已知表达序列的同源cDNA克隆作为普通野生稻特有基因的备选基因库。本研究分别以这67段cDNA序列为模版设计引物,在33个栽培稻和普通野生稻材料的全长cDNA序列中进行PCR扩增,经测序验证得到了1个普通野生稻特有基因。
通过基因克隆,利用农杆菌转化方法,把筛选到的特异基因导入中花-11栽培稻,对T0代转基因植株与野生型对照进行半定量PCR分析,结果显示该基因在转基因水稻根、茎、叶中都过量表达,并且在叶中表达量最高,而野生型对照中均无表达现象。中花-11转基因植株T1代苗三叶期比野生型苗同时期在形态学上表现为植株更加高大。同时测得该基因遗传转化植株的T1代苗该时期的叶绿素含量、脯氨酸含量均高于野生型苗同时期对照。将此转基因植株与野生型对照进行各种非生物逆境处理,通过植物生理学实验测定发现经高温处理后此转基因植株脯氨酸含量的增加幅度较野生型的更大,叶绿素含量的减少幅度较野生型的更小,初步认为此基因可能与水稻耐高温胁迫有关。