菌根真菌提高杨树抗溃疡病机制的研究

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本论文通过杨树真菌病害病原菌的分离、鉴定,将分离到的杨树溃疡病原菌聚生小穴壳菌(Dothiorella garigaria Sacc)与菌根真菌对杨树进行混合接种,研究杨树生长以及抗病性物质含量等的变化情况,探讨菌根真菌提高杨树抗溃疡病的能力。得出以下主要结论:1.杨树真菌病害病原菌的分离、鉴定从10种杨树上采集病害标本35份,分离出杨树病原真菌14株,其中子囊菌亚门3属4种12株,半知菌亚门2属2种2株。对14株真菌进行了ITS-rDNA序列测定,并构建系统发育树。将两株聚生小穴壳菌与GenBank上已提交的序列的相似系数和分离系数进行比较,确定本研究的杨树溃疡病原菌聚生小穴壳菌为a666和a669b两株。2.菌根真菌对杨树生长和抗溃疡病的作用将丛枝菌根真菌(Glomus mosseae, GM)和外生菌根真菌(Boletus luridus,BL)接种杨树(Populus×euramerieana.cv.“74/76”)后,接种效果表现为丛枝菌根真菌最好,外生菌根真菌次之,对照最差。接种丛枝菌根真菌和外生菌根真菌的杨树的叶绿素、可溶性蛋白的含量和根系活力的强度比对照分别提高80%和57%、47%和51%、32%和49%,当病原菌入侵后,形成丛枝菌根和外生菌根的杨树发病率和和病情指数分别降低了58.7%、57.6%和40%、53.7%。3.菌根真菌对杨树抗性相关酶活性和其他物质的影响形成菌根的杨树在受到病原菌的侵染后均可提高抗性相关酶的活性,形成丛枝菌根和外生菌根的杨树的超氧化物歧化酶、苯丙氨酸结氨酶活性在最高值时与对照相比分别提高了80%、43%和75%、47%。接种菌根真菌处理有效促进了感病的杨树体内游离脯氨酸的累积、降低了丙二醛(MDA)的含量,与对照相比均达到极显著差异(P<0.01),形成丛枝菌根和外生菌根的杨树脯氨酸、MDA的活性在最高值时与对照相比分别提高和降低了73%、54%和63%、27%。接种丛枝菌根真菌效果优于接种外生菌根真菌。4.菌根真菌诱导感病杨树病原相关蛋白的表达研究在感病前后形成不同类型菌根的杨树感病部位与对照相比总蛋白含量增加,而总蛋白的含量的提高与杨树抗病性正相关,证明诱导后产生了病原相关蛋白。形成外生菌根的杨树受到病原菌侵染时几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶以及病原相关蛋白被抑制;丛枝菌根杨树幼苗受到病原菌侵染时,几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶以及病原相关蛋白能够被诱导表达。丛枝菌根真菌在杨树幼苗时期对提高杨树抗溃疡病起重要作用。
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