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菊花（Chrysanthemum×morifolium Ramat.）是我国十大传统名花和世界四大鲜切花之一。菊花大多数为秋季开花,但是市场上迫切需要周年开花或节日开花的菊花品种,为调整花期所进行的遮光和补光处理将耗费大量能源,不利于节能环保,也给企业和花农造成了经济负担。研究菊花成花机理,获得提前开花的、有自主知识产权的品种将对生产有重大的意义。LEAFY（LFY）基因在植物成花过程中意义重大,它不仅决定着花由营养生长向生殖生长的转变,它还接连GA成花途径和长日途径的信号继而诱导花分生组织的转变,同时还是活化花器官基因的关键基因。LFY基因超量表达可以使植物的花期提前。DFL是从甘菊中分离的LFY同源基因,与金鱼草和拟南芥LFY基因氨基酸序列相似性分别为70%和63%,它的初步研究暗示DFL基因在甘菊成花的发育中起着重要作用。分析甘菊LFY同源基因表达模式,不仅是对目前LFY基因资源的补充,进而对进行转基因育种,达到能人为控制花期的目的,具有重要的理论和实践意义。甘菊（Chrysanthemum lavandulifolium（Fisch.ex Trautv.）Makino）是菊科菊属甘菊系多年生草本。它是菊花起源的重要亲本之一,遗传背景简单,开花期与菊花一致,属于典型的短日照植物,是菊属植物中分子生物学研究的理想模式植物,也有一定园林应用价值。如对其进行培养、观察、分析研究,可以对绝大部分为多倍体、非整倍体、遗传背景复杂的菊花的研究有很大的借鉴作用。目前已经有不少菊花栽培和遗传转化的研究,但还没有甘菊栽培和应用的相关报道。建立栽培体系,能为再生和转化培养提供有效材料,也为今后菊科分子机理研究和基因工程育种研究提供坚实的基础。本研究进行了甘菊的引种栽培和转基因研究,获得了花期提前的转化植株。主要研究结果如下:1.研究了甘菊种子不同储藏时间和不同条件下的萌发率,认为采收后当即播种和次年春季播种萌发率较高,不应该储存超过17个月。通过对甘菊生长环境因子和生长情况的研究,获得了盆栽和光照培养室栽培甘菊的合适方法,甘菊能够正常进行营养和生殖生长并获得后代。2.研究了甘菊对卡那霉素的敏感性,确定了试管苗不定芽诱导卡那霉素临界耐受浓度为5mg/L,试管苗不定根耐受浓度为20mg/L。3.本实验选择羧苄青霉素（Carb）作为遗传转化中的脱菌剂,合适的浓度为300-500mg/L。将由35S启动DFL基因的正反义表达载体（载体中同时包含有由另外两个35S启动的潮霉素筛选基因和GUS组织化学染色基因）,使用农杆菌（菌株为EHA105）转化甘菊。取组培苗的叶片进行2d的预培养,OD600为0.4—0.6的农杆菌侵染叶盘5min,转入共培养培养基暗培养2d,转至延迟培养基上,光培养2d,再将叶片转接至5mg/L潮霉素或卡那霉素、并添加500mg/L羧苄青霉素筛选培养基上,25℃光培养。以后每20d继代,期间观察其分化生长情况。待抗性芽长出,在添加3mg/L潮霉素或20mg/L卡那霉素的生根培养基中培养。4.对筛选出的抗性甘菊植株进行GUS、PCR、PCR-Southern检测,结果表明,成功获得6个转入DFL基因的甘菊植株株系。转基因植株扩繁后移栽培养,观察生长发育情况,同样栽培条件下,转基因植株与对照相比有明显高生长优势,并且开花提前可多达17d。收集对照和T0代转DFL基因的甘菊种子在培养基中栽培,转基因T1代种子通过抗生素筛选和PCR筛选,初步说明转基因效果能够稳定遗传到下一代。