基于微流控芯片的微泡制备及其生物应用

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微泡体积小、移动灵活,在微尺度平台上可实现微泵、混合、门控等功能,被广泛用于生化方向的研究。但微泡伸缩性强、移动快,甚至会对某些传统生物实验形成干扰,实现微泡的可操控性显得尤为必要。微流控芯片平台具有微型化、自动化、低成本、高通量、高效率等优势,为研究微泡提供了有力平台,大大增加了微泡的可操控性。在微尺度级别上研究气泡,充分利用微泡本身特性,变不利为有利,完成传统生物学方法难以实现的生物研究。  本文利用聚二甲基硅氧烷(PDMS)薄膜透气特性,设计了一种新型气泡发生结构,减缓气体进入芯片的速度,实现气泡可控性。基于气泡发生结构,本文研究了微泡在生物学上的应用。首先以血气栓症为原型,实时监测微泡形成过程对人脐静脉内皮细胞的影响。实验中以细胞荧光变化率作为数据统计值,除观察到与气泡毗邻细胞的钙响应,还观察到下游未接触细胞钙响应。处理组分别加入辛醇、苏拉明,实验结果明显检测到细胞钙响应减弱。同时对细胞做PI-Calcein-AM染色鉴定,结果显示与微泡接触到细胞仍处于存活状态。由此可知,微泡可引起细胞不同程度损伤,为进一步研究血气栓机理提供新的平台和理论基础。  基于微流控微泡形成平台,本文还研究了线虫气体趋化性行为。由于氮气、氧气在水中溶解度较低以及气泡的相对稳定性,形成了相对稳定的两路气体系统,秀丽隐杆线虫获得充足的时间选择气体偏好。实验结果显示线虫对二氧化碳具有明显的躲避行为,相较于空气,即21%O2,线虫更喜好11%O2,与文献报道一致,有力证明了系统用于研究气体趋化性的可行性,为下一步研究气体趋化性机理及三路气体趋化性奠定基础。
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