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第一章食蟹猴急性肝功能衰竭模型的建立及评价目的:稳定的、重复性好的大动物急性肝衰竭(ALF)模型是人工肝研究不可或缺的平台。本章研究旨在建立一种药物和外科食蟹猴ALF模型。方法:1、16只食蟹猴随机分为4组(A,B,C,D),分别经外周静脉注射0.30,0.25,0.20 + 0.05(间隔 24 h),0.20 g/kg 的 D-氨基半乳糖(D-gal);给药后观察受试猴的临床表现,生存时间,生化、凝血、颅内压(ICP)和肝脏的病理变化;2、6只食蟹猴行袖套式插管门静脉-右肾静脉转流联合胆总管结扎、切断术(PRRS+CBDLT),术后观察动物的临床表现,生化、凝血和肝脏的病理和组织学变化。结果:1、给药后受试猴均出现不同程度的精神萎靡,进食减少、黄疽等表现,生存时间ABC三组分别为56±8.7h、95±5.5h和99±2.2h,D组除1只136h死亡外,其余猴全部存活。血清肝酶、TBiL、Cr、BUN、血Amm等明显升高,ALB水平降低,PT明显延长,ICP增高等,病理学鉴定有明显肝细胞片状坏死、伴出血。2、术后实验猴血清AST、ALT、CK、LDH、ALP、TBiL、DBiL等明显升高,PT明显延长,ALB水平降低,术后第10天肝标本病理学和组织学检测出明显的肝细胞坏死、变性、凋亡等炎症反应。结论:成功构建了 D-gal诱导的药物性食蟹猴ALF模型和PRRS + CBDLT诱导的简化外科食蟹猴ALF模型。第二章基于微囊化猪肝细胞的生物人工肝安全性及有效性的评估目的:以具有自主知识产权的往返翻转灌注型生物反应器为核心,装载微囊化的猪肝细胞,组建生物人工肝(BAL),通过对食蟹猴ALF模型的救治实验对其安全性和有效性进行评价,为其进一步临床试验奠定基础。方法:采用D-gal分次诱导建立食蟹猴药物性ALF模型,离体胶原酶两步灌流法分离西藏小型猪原代肝细胞,制备海藻酸钠-聚赖氨酸(APA)裹肝细胞微囊,装入往返翻转灌注型生物反应器中,构建BAL,用于ALF食蟹猴的治疗。15只ALF食蟹猴随机分为三组:(1)ALF组(空白对照):模型猴仅观察不治疗;(2)BAL组:模型猴接受装载微囊化猪肝细胞的BAL治疗;(3)Sham组(设备对照):模型猴接入BAL系统体外循环6小时,反应器内装载不含细胞的APA空微囊。比较三组实验猴治疗前后的生存时间、生化指标、PT及ICP等变化。结果:治疗过程中实验猴均耐受良好。与两个对照组相比,BAL组受试猴生存时间分别延长14小时、16小时。BAL可以显著降低受试猴血清肝酶、TBiL、血Amm等浓度和ICP,具有明显的肝支持作用。结论:基于微囊化猪肝细胞的生物人工肝系统能够改善ALF食蟹猴的血生化指标和ICP,延长生存时间。