蜱类作为一类特殊的节肢动物,是专性吸血的陆生脊椎动物体外寄生虫,也是一类重要的媒介动物。蜱可携带各种病原体,传播多种疾病,并具有极强的繁殖能力,对人类健康和畜牧业生产造成极大危害。吸血过程在蜱类的生活史中占据着至关重要的地位,其与蜱类的交配过程密切相关,二者相互作用,引发蜱一系列生理上的深刻变化。因此,对蜱吸血过程以及吸血与交配的关系方面的探索应当是蜱类生理学研究中的一个重要层面。本研究通过对长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)吸血和交配过程中的重要功能分子饱血因子(engorgement factor, EF)进行原核表达、功能分析,并对其作用特点及开发抗蜱疫苗的潜在价值作进一步研究。我们通过设计特异性引物,从长角血蜱饱血雄蜱cDNA文库中扩增出长角血蜱饱血因子HLEFa (NCBI登录号：HQ908090)编码成熟肽的序列,完整的开放读码框含有456个碱基,编码152个氨基酸,预测蛋白分子相对分子质量为16.7kDa。将该基因克隆到pET-32a原核表达载体中,构建重组表达质粒pET-32a-HLEFa,并将其转入BL21大肠杆菌中,经IPTG诱导成功进行表达。重组蛋白re HLEFa大小约37kDa,其中载体蛋白约20kDa,目的蛋白约16.7kDa,与预期大小相符。将重组蛋白注射入吸血六天但未经交配的雌蜱体内,对饱血时间、饱血率、饱血体重和卵巢发育情况进行统计后发现,与PBS对照组相比,reHLEFa具有明显的刺激雌蜱饱血和卵巢发育的作用。以reHLEFa为抗原,免疫新西兰大白兔,将长角血蜱成蜱喂养于免疫过的兔子耳上,与载体蛋白对照组相比,可见吸血时间明显延长并且叮咬率下降,虽然产卵量未见明显变化,但饱血体重与对照组相比有较为明显的降低,说明重组蛋白具有作为抗蜱疫苗抗原的潜在价值。结果表明,HLEFa有作为抗蜱疫苗备选抗原的潜在价值,但仍有待于在其作用特点及制备方式上作进一步研究。