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本研究模拟高原环境下低气压条件下噪声性工作环境，探讨豚鼠在低气压环境下噪声对听器的损害作用；并通过丹参、川芎嗪的应用，观察药物在体液中的分布，以及其对低气压及噪声环境下听器损害的防护效果，探讨其作用机制。为低气压噪声性听器损伤的早期防治研究提供实验基础。 一、高效液相色谱法测定豚鼠血液、脑脊液和外淋巴液中的丹参素、川芎嗪 高效液相色谱法(high performance liquid chromatography，HPLC)法是常用的体内化学成分测定方法。本实验采用HPLC测定豚鼠肌注丹参注射液、盐酸川芎嗪注射液后，其主要的有效成分丹参素、川芎嗪在豚鼠血液、脑脊液、耳蜗外淋巴液中的吸收和分布情况。 结果： 1．豚鼠肌肉注射丹参注射液10min后血液中很快可检测到丹参素，80min在豚鼠的血液中丹参素含量达到最大值，585.84mg 第四军医大学博十学位论文/L。6h后血药浓度下降到可检测水平之下。而在耳蜗液和脑脊液中，始终未能检测到。表明药物主要是通过血液循环起作用。 2.豚鼠肌肉注射盐酸川芍嗦后在血液、脑脊液和耳蜗外淋巴液中可检测到川芍嗦的时间分别为smin、10min和smin:达到最大值的时间分别为ZOmin、20min和50 min;下降到可检测水平之下的时间分别为Zh、70 min和Zh。因此，肌肉注射后吸收快，能迅速进入机体，通过血脑屏障、血迷路屏障，进入脑脊液和耳蜗外淋巴液。 二、丹参对低气压环境下豚鼠噪声性听器损伤的防护作用及机理研究 实验模拟高原5500m高度，并给以1 IOdBSPL白噪声刺激，通过检测听性脑干反应(audst。ry brainstem response，ABR)闽移值，观察丹参对低气压及噪声环境下听闽阂移的影响;采用耳蜗铺片、诱生型一氧化氮合酶(indueible nitrie oxide Synthase，iNOS)、免疫组化染色及透射电镜等技术，观察丹参对低压及噪声环境下豚鼠耳蜗形态学变化的影响;检测血清中脂质过氧化的终产物丙二醛(MDA)含量及超氧阴离子自由基清除剂超氧化物歧化酶 (s0D)活性在听器损伤过程中的变化情况;测定血粘度的特点和变化规律，探讨低气压噪声环境下豚鼠噪声性听器损伤可能的机理以及丹参防治的意义。 结果: 1.丹参对低气压及噪声环境下豚鼠听阐改变的影响 暴露后各组豚鼠都出现不同程度的闽移;以4kHz处闽移最明显;闽移值随着低压噪声环境暴露时间的延长而增加:丹参注射液对低压及噪声暴露的豚鼠的听阖闭移具有一定防治作用。 2.丹参对低气压噪声环境下豚鼠听器损伤的形态学观察 (1)耳蜗铺片见低压噪声暴露后外毛细胞缺损较内毛细胞明显，阳性对照组的损伤较防治组与治疗组重。暴露7天组较暴露 第四军医人学博士学位论文1天组损伤重。 (2)正常耳蜗未见iNOS阳性表达。低压嗓声暴露后豚鼠耳蜗外毛细胞、内毛细胞、血管纹及螺旋神经节等部位均可见iNOS呈棕黄色颗粒的阳性反应。耳蜗iNOS阳性反应随暴露时间延长逐渐增强。各组染色随出舱后时间延长而逐渐减弱。除暴露1天组出舱1天阳性对照组与丹参治疗组差别不显著(p>0.05)外，其它各组间差别均显著(p<0.05)。 (3)透射电镜显示暴露7天组病变较1天组重。低压噪声暴露1天组出舱后7天，阳性对照组表现为毛细胞形态改变，外毛细胞胞浆可见空化、细胞核水肿变大、线粒体结构不清，传入和传出神经末梢空化、线粒体结构不清，神经轴突出现空化，神经健鞘变薄，板层排列紊乱，线粒体靖不清、空化;防治组与治疗组的病变表现较阳性对照组轻。随着出舱后时间的延长，病变逐渐减轻。 3.丹参对低压噪声环境下豚鼠血浆中MDA含量及SOD活性影响 暴露7d组比暴露ld组血清MDA浓度的均数值高，MDA浓度随着在低压噪声环境暴露时间的延长而增加;而血清SOD活性则呈相反趋势，暴露ld组比暴露7d组血清SOD活性的均数值高，暴露后其活性随着随暴露时间的延长而下降;应用丹参注射液可以降低MDA值、提高SOD活性，丹参注射液具有抗脂质过氧化及提高SOD活性作用。 4.丹参对低气压噪声环境下豚鼠血粘度的影响 暴露1天组，出舱后1天全血粘度均数值除正常组与丹参防治组阿全血粘度值差异没有统计学意义外(p>0 .05)，其余彼此之间全血粘度值差异均有统计学意义(p<0.05)。出舱7天以后全血粘度谊各组全血粘度均数值组间差别均无统计学意义(坏0.01)，基本都恢复正常。说明丹参注射液注射液可防止暴露导致的血粘度增高;攀露1天所引起的血粘度值增高有自然恢复可能，阳性对照组 第四军医大学博十学位论文在出舱7天全血粘度值恢复正常。暴露7天组，暴露后血粘度升高较明显，出舱后1天全血粘度值阳性对照组与丹参治疗组间全血粘度值差异没有统计学意义外(p>0 .05)，其余彼此之间全血粘度值差异均显著(p(0 .05)。出舱后7天阳性对照组血粘度值最高，丹参治疗组全血粘度值比丹参防治组全血粘度均数值高，丹参防治组恢复较快。暴露7天组，出舱后7天全血粘度值四组彼此之间差别