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本文主要是基于天麻醇提物中的主要成分影响灰树花深层发酵胞外多糖组分及其降血糖活性的机理研究。首先,对灰树花深层发酵得到的胞外粗多糖进行脱蛋白工艺优化,达到初步纯化灰树花胞外多糖的目的,为进一步纯化灰树花胞外多糖奠定基础。其次,采用阴离子交换柱层析法对不同发酵培养基所得多糖进行组分分离,初步探讨天麻有效成分参与灰树花发酵后其多糖的组分变化情况。最后,从酶学角度分析,天麻有效成分参与灰树花发酵后其多糖对a-葡萄糖苷酶活性抑制率的影响,进而推断天麻有效成分参与灰树花发酵后其多糖的降血糖活性作用。实验的主要研究结论如下:以脱蛋白效率和多糖损失率为指标对比了sevage法、酶法、三氯乙酸法三种脱蛋白方法对灰树花胞外多糖的脱蛋白效果。其中三氯乙酸法相对sevage法、酶法脱蛋白效果更好,脱蛋白效率为68.40%,多糖损失率为21.11%,最佳添加量为3%,经TCA法处理后的多糖通过紫外扫描检测,其结果显示在200~600 nm范围内吸收明显减少,说明处理后的粗多糖溶液几乎不含蛋白质和核酸。此方法操作简单、切实可行,清除蛋白效果好,适用于灰树花胞外多糖中蛋白质的去除。不同培养基参与灰树花深层发酵获得GFP-1、GFP-2、GFP-3、GFP-4四种灰树花胞外多糖。四种多糖均可由超纯水洗脱出EPS-1中性多糖,用0.2 mol/L NaCl洗脱出EPS-2酸性多糖,0.5 mol/L NaCl洗脱出EPS-3酸性多糖。但天麻醇提物、对羟基苯甲醛和对羟基苯甲醇加入培养基发酵后所获得灰树花胞外多糖GFP-2、GFP-3、GFP-4均可由0.5 mol/L NaCl洗脱出EPS-4酸性多糖,且GFP-4中EPS-4增加得最多。天麻有效成分能够影响灰树花胞外多糖的量在各组分间的重新分布,且对羟基苯甲醛对灰树花代谢过程中胞外多糖组分的影响最大。在灰树花液态深层发酵系统中添加天麻有效成分获得四种灰树花胞外多糖GFP-1、GFP-2、GFP-3、GFP-4。分析GFP-1、GFP-2、GFP-3、GFP-4及阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶半抑制浓度IC50从大到小顺序为:GFP-1>阿卡波糖>GFP-4>GFP-3>GFP-2。降血糖活性由高到低的顺序为:GFP-2>GFP-3>GFP-4>阿卡波糖>GFP-1。说明常规培养基发酵培养的灰树花胞外多糖降血糖活性低于临床药物阿卡波糖。当分别向培养基添加天麻醇提物和其单一有效成分对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛后,所得灰树花胞外多糖降血糖活性均有所增加并且增加后的降血糖活性高于临床药物阿卡波糖,其中天麻醇提物的增效效果最好。