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随着2型糖尿病发病率的升高,糖尿病肾病已经成为终末期肾病的重要原因,防治糖尿病肾病、延缓糖尿病肾病的发生发展迫在眉睫。本论文对近年来中西医糖尿病肾病临床与基础研究进行了较为全面的概述,总结了刘铜华教授治疗糖尿病肾病的学术思想和临床经验,在前期研究的基础上,通过前瞻性自身前后对照试验,对固肾降白颗粒治疗糖尿病肾病的临床疗效进行了评价;通过自发动物模型,对固肾降白颗粒治疗糖尿病肾病的作用机理与关键位点进行探讨。试验目的:评价固肾降白颗粒对脾肾两虚、湿热瘀阻型早期糖尿病肾病患者的临床疗效;观察固肾降白颗粒对肥胖db/db小鼠肾脏TGF-β1-Smad信号通路的影响,阐明其治疗糖尿病肾病的作用机理。试验方法:临床试验采用前瞻性自身前后对照研究方法,选择服用降糖药或使用胰岛素治疗后,空腹血糖≤7.8mmol/L,餐后2h血糖≤11.1mmol/L,HbA1C<8.5%;服用降压药物,血压<140/90mmHg的36例脾肾两虚、湿热瘀阻型早期糖尿病肾病患者进行为期12周的临床疗效观察和安全性评价。动物试验将db/db小鼠32只,分为模型组、厄贝沙坦组、固肾降白颗粒组、固肾降白颗粒加厄贝沙坦组、另设8只db/m小鼠作为正常组,灌胃12周,每周观察血糖、体重变化,每四周观察一次24h尿蛋白定量,试验结束后,检测血清胰岛素、葡萄糖、肌酐、尿素氮水平;检测肾组织SOD、MDA含量;HE染色、Masson染色、PAS染色、TUNEL凋亡法进行肾脏病理观察;免疫组化法检测肾组织TGF-β1、α-SMA、E-Cadherin蛋蛋表达。Western blot检测肾组织TGF-β1、BMP7、α--SMA蛋白表达。RT-PCR检测肾组织TGF-β1R、Smad3基因表达。试验结果:临床试验部分,36例2型糖尿病肾病患者,脱落3例,剔除3例,30例患者完成了为期12周临床观察,结果发现,固肾降白颗粒可以显著减少24h尿微量白蛋白排泄率(p<0.01),总有效率达86.7%;显著改善中医症状积分(p<0.01),总有效率为76.7%,其中,主要改善了腰膝酸软(p<0.01)、尿浊(p<0.01)、神疲乏力(p<0.01)的症状积分,口干口渴、口苦口粘、夜尿等症状积分有轻度降低。治疗中,固肾降白颗粒对肝肾功能无影响,无明显不良反应发生。动物试验部分,经过12周的治疗,固肾降白颗粒可以显著降低肥胖db/db小鼠24h尿白蛋白定量(p<0.05),增加肾组织SOD含量(p<0.01)、降低肾组织MDA含量(p<0.01),对肾重/体重比、血糖、胰岛素、Cre、ALT无影响。HE染色提示固肾降白颗粒可以减轻肾脏病理变化,Masson染色提示,固肾降白颗粒可以显著降低胶原面积比(p<0.05) ; PAS染色提示,固肾降白颗粒可以显著降低糖原面积比(p<0.01) ; Tunel结果提示,固肾降白颗粒可以显著降低凋亡平均光密度值(p<0.0 1 );免疫组化结果提示,固肾降白颗粒可以显著降低TGF-β1( p<0.05 )、α-SMA(p<0.01)蛋白表达含量,增加E-cadherin (p<0.05)蛋白表达含量。Western-blot结果提示,固肾降白颗粒可以显著降低TGF-β1蛋白表达(p<0.01 )及α-SMA(p<0.01 )蛋白表达,轻度增加BMP7蛋白表达。RT-PCR结果提示,固肾降白颗粒可以显著降低TGF-β1R (p<0.05)、Smad3 (p<0.01)基因表达。固肾降白颗粒组总体检测指标与厄贝沙坦组相近,部分指标疗效优于西药,固肾降白颗粒+厄贝沙坦组部分检测指标好于单用一种药物。结论:1.固肾降白颗粒可以显著降低脾肾两虚、湿热瘀阻型早期糖尿病肾病患者24h尿微量白蛋白,改善临床症状。2.固肾降白颗粒可以降低肥胖db/db小鼠尿白蛋白,保护肾功能,延缓肾损害。3.抗氧化应激是固肾降白颗粒肾保护的作用机制之一,TGF-β1、Smad3、α-SMA、BMP-7、E-cadherin信号通路是固肾降白颗粒治疗糖尿病肾病的关键位点。4.固肾降白颗粒与ARB类降压药合用有协同效应。