木霉菌(Trichoderma spp.)是一类普遍存在并具有重要经济意义的生防益菌,多年来,木霉菌以其高效、安全、不易引起病原菌抗药性的特点,在以可持续发展为宗旨的生物防治中发挥了重要作用,已作为生防菌剂在美国、印度、瑞典等国家商品化生产,我国近年来也有此类产品问世,其生产方法大多采用固体培养法,以玉米粉、麸皮等农副产品为培养基质,以获得货架期较长的分生孢子。在生产中如何降低生产成本是加速木霉菌实用化进程的关键。我国是一个农业大国,每年产生的秸秆剩余物数量巨大,而被利用的量却很少。部分农民采取了简单焚烧或随意堆积处理,不但浪费了宝贵的自然资源,还污染了大气环境,对人类健康造成了危害。由于木霉在工业上是一种优良的纤维素酶产生菌,对部分农药亦有一定的降解作用,如果能够利用秸秆为原料生产木霉制剂,且在利用木霉制剂防治病害的同时,使农作物中的农药残留得到降解,这将对农业的可持续发展及人类健康具有重要意义,为此本文展开了以下工作:1、以本实验室筛选的具有一定生物防治效果的木霉为出发菌株,通过木霉在以纤维素为唯一碳源的CMC培养基、刚果红培养基和滤纸条液体培养基检测生长直径、透明圈和生长程度等指标,筛选出9株能够分解利用纤维素的优势木霉菌株,并研究了其Cx酶活性、滤纸酶活(FPA)和产还原糖能力,筛选出3株降解纤维素最强的木霉菌J15、J16、J18。以农业上常用的高效氯氰菊酯、毒死蜱和吡虫啉3种杀虫剂为唯一碳源制成培养基,考察3种木霉在农药平板培养基上的生长情况,并分别测定其对3种农药72h的降解率。结合各菌株的纤维素降解能力,最终确定J16木霉菌为降解纤维素能力较强,农药降解率最高的目标菌株,经形态学观察和分子生物学分析,将其鉴定为脐胞木霉( Trichoderma brevicompactum)。经检索,目前国内未见有此种的相关报道。2、对脐胞木霉(Trichoderma brevicompactum)的生物防治特性、利用秸秆生产木霉孢子制剂时不同因素对产孢量的影响进行了研究。结果如下:平板对峙结果表明脐胞木霉(Trichoderma brevicompactum)对萝卜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.)、西瓜枯萎病菌(F. oxysporum f. sp. niveum)、棉花枯萎病菌(F.oxysporum f. sp. vasinfectum)、小麦赤霉病菌(F. graminearum)、黄瓜枯萎病菌(F. oxysporum f. sp. cucumerinum)等病原微生物具有较强的抑制作用,抑制率分别为56.6%;81.2%;65.6%;53.5%;70.6%;用单因素和正交试验法,确定脐胞木霉(Trichoderma brevicompactum)产孢的最优条件为:秸秆:麸皮=2:1;含水量为40%;接种量为12%;温度为28℃;培养时间为9d。3、脐胞木霉(Trichoderma brevicompactum)在以农药为唯一碳源的液体培养基中培养7d,分别测定培养液中高效氯氰菊酯、毒死蜱和吡虫啉的残余量,可得3种农药的降解率分别为90.43%、86.71%、78.81%。为进一步验证脐孢木霉( Trichoderma brevicompactum)在农业生产中对高效氯氰菊酯和毒死蜱的降解效果,将脐胞木霉(Trichoderma brevicompactum)制成孢子制剂;选择大棚温室中的油菜为供试植物,在喷洒农药12h后喷施木霉孢子制剂,分别在1、5、11、14、17d进行定时取样,用气相色谱检测油菜中的农药残留,结果显示,随着时间的延长,农药降解率逐渐升高,高效氯氰菊酯和毒死蜱的降解率分别提高了45.54%、72.58%。