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目的：应用聚肌胞苷酸((poly(I：C)或PIC)和阳离子脂质体二油酰磷脂酰胆碱(DOTAP)混合制备poly(I：C)-DOTAP脂质体混合物(PDLC)。体内检测PDLC对小鼠树突状细胞(Dendritic cells，DC)成熟活化的影响。体内实验考察PDLC疫苗对小鼠特异性抗体，以及对正常/荷瘤小鼠细胞毒性T淋巴细胞的作用。并进一步检测PDLC疫苗对荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用以及相关的信号传导。 方法：薄膜水化超声法制备DOTAP和包裹抗原DOTAP，用电位粒度仪表征。100μmolDOTAP/包裹抗原DOTAP和10μgpoly(I：C)室温混合15分钟，制备PDLC。PDLC刺激小鼠树突状细胞24小时，流式细胞术和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测小鼠树突状细胞标志分子CD83和CD86以及上清中细胞因子IL-12和IFN-a的表达。用poly(I：C)、DOTAP和PDLC疫苗于第0天和第14天腹腔免疫小鼠，检测初免后第10天和第21天血清中的OVA特异性抗体滴度。OVA再刺激脾细胞96小时，检测上清中细胞因子IFN-γ和IL-5的表达及脾细胞增殖。正常/荷瘤小鼠分别每隔一周腹腔免疫，于第二次免疫后第7天，hepal-6全抗原再刺激脾细胞72小时，检测细胞毒性T细胞杀伤作用及上清中IFN-γ的表达。共聚焦和流式细胞术检测小鼠肿瘤的凋亡及肿瘤组织中浸润的NK和CD8+T细胞。此外，按比例混合荧光标记的poly(I：C)的PDLC孵育小鼠树突状细胞1小时/4小时后，考察树突状细胞对poly(I：C)的摄取以及与TLR3的共定位。进一步应用荧光定量PCR、western blotting方法检测IRF3和IRF7的mRNA以及其磷酸化水平。 结果：PDLC促进树突状细胞高表达CD86和CD83，以及分泌大量细胞因子IL-12和IFN-α。PDLC疫苗显著上调OVA特异性IgG2a和IgG2b抗体表达，增加脾细胞增值以及细胞因子IFN-γ的分泌。此外，PDLC疫苗可有效诱导肿瘤特异性CTL反应，增强特异性IFN-γ分泌提高150倍。在荷瘤小鼠中，PDLC疫苗比其他疫苗更能增强CD8+T细胞和NK细胞在肿瘤组织和脾脏中的表达，显著诱导血清中大量分泌IFN-α，更好地诱导肿瘤凋亡和抑制肿瘤生长。同时PDLC优于其他处理组显著增强IFN-α和IFN-β的mRNA表达，以及增强小鼠树突状细胞对poly(I：C)摄取并且激活TLR3/IRF3的信号通路。 结论：我们有理由相信PDLC显著增强了小鼠骨髓来源树突状细胞对poly(I：C)的摄取和TLR3下游信号的活化，并最终促进了树突状细胞成熟和Ⅰ型干扰素产生，因此PDLC作为新型高效佐剂能显著增强肿瘤疫苗的抗肿瘤效果。