基于纳米金的多轮扩增研究

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纳米金粒子能够增强聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction )的特异性,本文主要是通过在每一轮PCR体系中加入合适浓度的纳米金粒子来研究PCR所能达到的最大扩增轮数。实验表明,在一个典型的PCR反应中,基于纳米金粒子的PCR最多能够进行7轮扩增反应。从第一轮扩增开始一直到第六轮,PCR产物的电泳图均能够得到明显单一的条带,当扩增到第七轮的时候,纳米金粒子却只能使其部分优化,当进行第八轮扩增的时候,目标条带则完全消失,电泳图上呈现出大量弥散的非特异性条带。相比之下,单纯靠稀释模板的常规多轮扩增只能进行3轮反应。我们也对纳米金的表面进行了修饰,如修饰BPS、茎环结构DNA,TritonX-100等,研究发现,修饰后的纳米金对PCR的特异性方面依然有不同程度的优化作用。另外,我们建立了一种快速分离回收纯化纳米金颗粒的方法,不仅简单、成本低廉,而且不会明显影响纳米金的聚集。
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