本试验结合传统细菌学鉴定方法和分子生物学方法,从发病死亡的林麝肺组织和肝组织中分离鉴定出了三株铜绿假单胞菌,提取分离株的粗毒素并作用于家兔外周血淋巴细胞,观察粗毒素对淋巴细胞的增殖影响。根据文献合成保守性通用引物,对PAsp-1、PAsp-2、PAsp-3的16SrDNA进行扩增和目标片段测序,将测序结果在NCBI上进行相似性比较,运用生物学软件DNA star7.1进行发育树的构建,并结合常规的细菌学鉴定结果,最终确定PAsp-1、PAsp-2、PAsp-3为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。采用单因素试验对各菌株的培养条件进行了优化,确定了PAsp-1、PAsp-2和PAsp-3的最佳液体培养条件均为：温度40℃,pH值6.5。在上述最佳条件下培养铜绿假单胞菌,三株菌的增殖速度均在6-14h最快,在14h时达到峰值。药物敏感性试验结果显示,PAsp-1、PAsp-2和PAsp-3均对庆大霉素、丁胺卡那霉素、哌拉西林、头孢他啶、头孢哌酮、环丙沙星敏感；对羧苄青霉素、四环素和头孢曲松中度敏感；对青霉素、头孢唑啉、氨苄西林、红霉素、复方新诺明和美满霉素具有耐药性。致病性试验采用小鼠腹腔注射lm1/只,浓度分别为2.00×107cfu/ml、 2.20×107cfu/ml、2.40×107cfu/ml、2.60×107cuf/ml和2.80×107cfu/ml的细菌培养物,PAsp-1、PAsp-2和PAsp-3的半数致死量(LD5o)分别为2.591 ×107CFU/ml、 2.577×107CFU/ml和2.634×107CFU/ml。淋巴细胞增殖试验中,通过粗提毒素蛋白含量的测定,确定了PAsp-1、PAsp-2和PAsp-3的最佳毒素蛋白提取时间为48h,其毒素浓度分别为7.137mg/ml、9.021mg/ml和7.876mg/ml。从兔外周血中分离淋巴细胞,细胞数达2.5×106个/ml,活细胞百分率达96.8%。 PAsp-1、PAsp-2和PAsp-3的粗提毒素对淋巴细胞的半数抑制浓度(ICso)分别为6.745mg/ml、6.536mg/ml和7.195mg/ml。