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人血清白蛋白(Human serum albumin, HSA)是迄今为止产量最大、用量最大的蛋白质药物。可是现在的生产方式主要是人的血液通过分级过滤获得,产量有限,而且因为血浆来源复杂,容易导致污染。因此,通过转基因技术构建乳腺表达载体,利用体细胞克隆技术得到分泌含人血清白蛋白乳汁的转基因克隆动物,并从动物乳汁中提取人血清白蛋白,是解决人血清白蛋白供应短缺的有效方法。乳腺生物反应器生产人血清白蛋白具有生产成本低、产品产量高、活性高、易于纯化等优点。制约转基因乳腺生物反应制药的主要因素是体细胞核移植技术效率低下。因此,本研究以延边奶山羊和本地绵羊为研究对象,对卵母细胞体外成熟、延边奶山羊-绵羊重构胚胎的构建及体外发育进行了研究,以期提高核移植效率,为以后得到表达人血清白蛋白的转基因延边奶山羊奠定坚实的基础。本研究共分为三个部分,第一部分进行了不同核成熟抑制剂及抗氧化剂对绵羊卵母细胞体外成熟的影响的研究；第二部分进行了转人血清白蛋白延边奶山羊-绵羊重构胚的构建研究；第三部分是表没食子儿茶素没食子酸酯(Epi-gallocatechin-3-gallate, EGCG)对转人血清白蛋白延边奶山羊-绵羊重构胚体外发育质量的影响。主要研究结果如下：1.在绵羊卵母细胞体外成熟培养过程中,核成熟抑制剂HX、IBMX最适宜的添加浓度分别为2mM和0.2mM,抗氧化剂最佳添加量,除了半胱氨酸为0.6mM、 EGCG为5μM之外,其余三种β-ME、VC、VE最佳添加量均为100μM；2.盲吸去核法或化学辅助去核法去核,重构胚的卵裂率及囊胚率没有显著差异,但化学辅助去核法(0.2μg/mL的Deme处理0.5h)去核率为100%,可以高效快速地去核,且不影响重构胚的早期发育；3.延边奶山羊-绵羊重构胚的适宜电融合参数为2个120V,40μs次的电脉冲,适宜激活方法为Ion预激活5分钟,6-DMAP激活2h；4.重构胚体外培养时EGCG的适宜添加浓度为15μM,适宜添加时间为IVM和重构胚体外培养1-2天。