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第一部分 围产期BPA暴露对母鼠及子代糖稳态的长期影响双酚A(BPA)是环境中广泛存在的内分泌干扰物,主要存在于塑料制品中。流行病学研究表明BPA与心血管疾病和2型糖尿病存在显著关联。然而,在糖代谢异常相关疾病的发病过程中,BPA是否存在关键暴露窗尚未阐明。本实验的主要目的是研究围产期BPA暴露对母鼠及子代成年后糖稳态的长期影响,并进一步分析对BPA敏感的关键发育窗。交配母鼠见栓第一天为P1,子代小鼠出生后第一天为PND0。于围产期不同阶段给予怀孕母鼠皮下注射100μg/kg BPA:1) P1-P6组,着床前期;2)P6-PND0组,胎儿期;3)PND0-PND21,哺乳期;4)P6-PND21,胎儿和哺乳期联合暴露。分别在产后3月、6月和8月,对母鼠和子代小鼠进行糖耐量和胰岛素耐量检测,并分析BPA对胰岛形态学和p细胞功能的影响。结果显示:围产期BPA暴露对母鼠及子代小鼠糖稳态均产生了不利影响。对于子代,P6-PND0暴露组小鼠于3月至6月均出现糖代谢异常,但雄性小鼠较雌性小鼠更易受损伤,糖代谢异常持续至8月龄仍存在。而在PND0-PND21和P6-PND21组,只有3月龄雄性小鼠显示糖耐量受损。围产期BPA暴露引起3月龄小鼠的p细胞团块显著增加,由细胞增殖、新生和凋亡状态共同改变所致。p细胞胰岛素分泌功能和机体胰岛素敏感性的变化趋势与糖耐量的改变相一致。对于母鼠,围产期BPA暴露引起产后3月母鼠糖稳态异常,伴有β细胞胰岛素分泌能力降低及胰腺形态学改变。至产后8月,母鼠糖耐量未现异常,但胰岛β细胞团块减少,提示p细胞团块与功能存在分离。以上结果表明,围产期BPA暴露对母鼠及子代小鼠糖稳态的调节具有长期影响。这一效应具有剂量、性别和时间依赖性。胎儿期作为胰腺发育的关键时期,也是对BPA暴露最敏感的重要时期。第二部分 围产期BPA暴露对脂肪及血脂水平的长期影响双酚A是广泛存在的环境内分泌干扰物,能干扰代谢稳态产生不利影响。BPA暴露是2型糖尿病的危险致病因素。然而,BPA暴露是否参与引起高脂血症还未阐明。本研究的主要目的是探讨围产期BPA暴露对母鼠及子代脂肪组织和脂代谢的长期影响。怀孕母鼠分别于围产期的不同阶段给予皮下注射100ug/kg/d的BPA。分别于产后3月和8月检测小鼠脂肪组织重量和血脂水平,并对脂肪组织进行形态学分析。结果表明,围产期BPA暴露对母鼠及子代小鼠脂代谢均产生了不利影响。对于3月龄雄性子代,P6-PND0, PND0-PND21和P6-PND21 BPA处理组小鼠均表现为血甘油三脂、胆固醇水平升高。而3月龄雌性子代,仅胎儿期BPA处理组小鼠显示血脂水平上升。对于产后3月母鼠,胎儿期和哺乳期BPA暴露均引起血脂浓度升高。围产期BPA暴露引起脂肪组织增加,主要是由脂肪细胞的肥大引起。至8月时,不管是母鼠还是子代小鼠,脂代谢均与对照组无明显差别,且脂肪形态学变化亦基本恢复。脂代谢紊乱与糖代谢紊乱的发生具有高度一致性。综上,围产期BPA暴露对母鼠及子代小鼠脂肪组织及血脂的调节产生长期的不利影响,引起血脂水平升高。这一效应具有性别和时间依赖性。第三部分 雌激素受体GPER参与双酚A介导的小鼠糖稳态的损伤及机制雌激素和环境拟雌激素物质(BPA)能通过雌激素受体信号通路调节胰腺功能。小鼠胰岛p细胞中表达的雌激素受体包括ERα、ERβ和GPER。ERα口ERβ介导的信号通路可分别参与调节胰岛p细胞胰岛素合成和分泌功能。然而,关于GPER在p细胞中的作用及激活的信号级联通路却鲜有报道。本研究主要目的:分别从体内和体外实验探讨GPER是否参与了BPA介导的糖稳态的调节及其机制。在体内实验中,G1、BPA和E2均能增加胰岛素释放和胰岛素含量。在体外实验中,三者均能显著增加高糖刺激下胰岛素的分泌,促进胰岛胞内钙浓度的升高;同时还可增加胰岛素的合成和含量。而这些作用均能被GPER特异性拮抗剂G15所抑制,证实GPER参与了BPA介导的p细胞胰岛素合成和分泌能力的调节。综上,通过体内和体外实验的研究,证实GPER参与了BPA介导的胰岛β细胞胰岛素合成和分泌能力的调节,参与体内糖稳态的调节过程。