目的:NLRP3炎症小体是先天免疫系统的重要组成部分,它通过介导caspase-1激活和促炎细胞因子IL-1β/IL-18的分泌,以响应微生物感染和细胞损伤。干扰素调节因子3（Interferon Regulator 3,IRF3）是抗病毒固有免疫中调节干扰素产生的关键因子,同时IRF3在炎症反应以及抗菌免疫中也发挥重要作用。本课题旨在研究IRF3调控NLRP3炎症小体活性的具体机制,为NLRP3炎症小体异常激活所导致的疾病提供新的治疗靶点。方法:本课题选用IRF3敲除小鼠作为动物模型。分别取野生型和IRF3敲除小鼠的腹腔巨噬细胞,用NLRP3炎症小体的激活剂LPS+ATP/Nig.刺激细胞来检测IRF3对NLRP3炎症小体的活性影响。qPCR检测相关炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α以及NLRP3的mRNA表达水平;蛋白印迹法检测NLRP3炎症小体组分NLRP3、ASC、Caspase-1以及下游效应分子Cleaved-Caspase-1、Cleaved-IL-1β的蛋白表达水平,同时还检测了炎症小体激活后ASC以及NLRP3的寡聚化水平。为了明确IRF3调控NLRP3炎症小体的具体机制,我们用内源性及外源性Co-IP以及免疫荧光共定位的方法检测了 IRF3与NLRP3的相互作用情况以及两者结合的具体结构域。同时还建立了 DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎的模型,研究IRF3能否通过NLRP3炎症小体调节肠炎。评估造模小鼠的体重变化、疾病活动指数、结肠组织病理情况及评分;流式细胞术检测巨噬细胞、中性粒细胞免疫细胞的比例;qPCR检测结肠组织NLRP3炎症小体相关效应因子表达水平;Western Blot检测结肠组织中NLRP3炎症小体组分以及相关活性分子的表达情况。结果:我们发现IRF3是激活NLRP3炎症小体的负调节因子。IRF3敲除小鼠可以显著上调IL-1β、IL-18、TNF-α炎症因子的水平;同时IRF3敲除后可以激活产生更多的NLRP3炎症小体:NLRP3的mRNA和蛋白水平显著增加;剪切过的具有活性的Caspase-1和IL-1β的水平和ASC和NLRP3的寡聚化水平在IRF3敲除后也明显上调,同时IRF3也显著抑制了 ASC斑点的生成。免疫共沉实验验证了 IRF3与NLRP3可以结合相互作用,也进一步确证了 IRF3的IAD结构域与NLRP3的NATCH结构相互结合。此外,DSS诱导的小鼠结肠炎模型显示,IRF3缺乏小鼠与WT小鼠相比表现出更轻的肠道炎症反应,体重下降更慢、疾病活动指数更低、结肠长度更长以及更轻的结肠组织病理状况。肠系膜淋巴结中巨噬细胞和中性粒细胞比例更低,并且在结肠组织中激活更多的NLRP3炎症小体。