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目的:骨髓增生异常综合征(MDS)是一组获得性造血干细胞克隆性疾病,主要表现为无效造血、病态造血和易进展为急性白血病。目前MDS发病率在我国约为4/10万人口,并呈逐年增高倾向,已成为严重危害中老年人健康的恶性造血系统肿瘤。因为MDS极大的异质性,其诊断尚未有一致性的金标准,所以MDS的诊断迄今为止仍是血液病诊断的重点和难点。本研究探讨了细胞形态学检查、流式细胞免疫分型、细胞遗传学(Morphology、Flow Cytometric Immunophenotype、Cytogenetics,MIC)在MDS诊断中的作用,以期望减少MDS的误诊和漏诊,为临床提供诊断依据。方法:以2006年维也纳最低诊断标准及2008年WHO的骨髓增生异常综合征诊断分型标准为主要参考,对41例确诊的MDS患者和18例疑似MDS患者的骨髓细胞涂片,骨髓病理学检查,细胞遗传学及细胞流式免疫分型的特点进行回顾性研究。选择同期就诊的30例再生障碍性贫血患者(AA)作为对照组。用SPSS17.0统计软件对数据进行统计分析。结果:1临床资料59例患者中,35例患者有头晕、乏力、面色苍白;24例伴有发热;6例有出血现象;6例肝脾肿大;1例淋巴结肿大。2细胞形态学检查2.1血常规59例患者中,红细胞平均数为2.13×1012/L;白细胞平均数2.74×109/L;血红蛋白平均数82g/L;血小板平均数91×109/L;平均红细胞体积(MCV)100.6fl。网织红细胞百分比平均数为0.5%。单系血细胞减少患者2例,两系血细胞减少患者14例,全血细胞减少患者43例。油镜分类计数200个白细胞,59例患者中,原始细胞百分比平均数为2.7%,35例患者检测到幼稚粒细胞,其中出现原始粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞及晚幼粒细胞的病例数分别为23(65.7%)例、1(2.9%)例、10(28.6%)例、1(2.9%)例。相应各阶段幼稚粒细胞所占数值范围分别为(0~15个)、(0~1个)、(0~18个)、(0~24个)。23例成熟粒细胞胞质颗粒减少,21例假Pelger-Huet畸形。13例患者外周血检测到有核红细胞,数值范围为(0~18个)。27例成熟红细胞出现明显的异形性,可见靶形、椭圆形、泪滴形以及巨型红细胞。未见巨核细胞,17例可见巨大血小板。2.2骨髓涂片检查59例患者中,骨髓增生活跃或明显活跃者55例,4例增生减低。红系病态造血比例占66.1%。12例幼红细胞出现胞质空泡。39例幼红细胞出现双核,7例幼红细胞出现三核,3例出现花瓣核、不规则核。粒系病态造血的比例占40.7%。17例患者早期阶段粒细胞颗粒明显减少或缺如,6例胞浆内颗粒明显增多。24例观察到假Pelger-Huet畸形,2例分叶过多。3例出现Auer小体。巨核系病态造血比例为20.3%。10例为低分叶的小巨核、单圆核巨核和淋巴样巨核。2例患者出现多圆核巨核细胞。18例患者糖原染色幼红细胞阳性。27例铁染色外铁阳性(++~+++),23例内铁升高,出现环铁的患者共8例,并且各亚型均有出现。3骨髓病理检查所有患者中,骨髓病理检查显示细胞增生程度为活跃或明显活跃的共46例。2例网硬蛋白增多。17例小血管增生明显。8例出现幼稚前体细胞异常定位(ALIP)。15例CD34+细胞增多。32例检测到微巨核细胞。4常规染色体核型分析所有59例患者染色体检查结果显示核型异常者25例,其中复杂染色体核型异常占36.0%,亚型分布为RCUD 1例,MDS-RCMD 4例,MDS-RAEB-I 3例,MDS-RAEB-Ⅱ1例。简单染色体核型异常的亚型分布以MDS-RCMD为主。8号染色体异常2例。-5、5q-各2例,-7、7q-各2例,20q-1例。5 FCM分析5.1髓系前体细胞免疫表型异常应用CD34、CD117、HLA-DR、CD11b、CD15单克隆抗体组合分析MDS患者髓系前体细胞免疫表型。MDS组检测到CD34+原始细胞免疫表型的异常分别为:23例原始细胞比例增高,呈聚集性分布;11例CD45表达减低;7例表达粒细胞成熟阶段抗原CD11b、CD15;12例表达淋巴细胞相关抗原。5.2粒细胞免疫表型异常选择CDl3/CDl6及CD11b/CDl6单克隆抗体组合检测分析粒细胞分化成熟期间出现的免疫表型异常。MDS患者39例SSC减低;34例CD13/CD16、CD11b/CD16关系模式异常;28例CD56阳性表达;未检测到淋巴系相关抗原异常表达。5.3单核细胞免疫表型异常59例MDS患者中,12例出现CD56异常表达;5例异常表达CD34;11例CD33表达减少;19例CD14表达减低;1例表达淋巴系相关抗原。5.4红细胞免疫表型异常采用CD71、Gly A单克隆抗体组合检测红细胞群。MDS患者中28例CD45表达减弱;10例CD71表达异常;9例Gly A表达异常;1例异常表达CD117。结论:细胞形态学、细胞遗传学、骨髓病理学和细胞流式免疫分型对骨髓增生异常综合征的诊断均具有重要意义,但其对MDS的诊断又各具特点,各有侧重,相互补充。细胞形态学是MDS诊断和分型的关键和基础。常规染色体核型检查在MDS患者特别是疑似MDS患者的初诊及随访诊断中起着重要作用。骨髓活检对于评价骨髓组织结构、骨髓增生程度、网状纤维增生和巨核细胞的病态造血改变发挥独特作用。流式细胞免疫分型对于评估造血细胞的异常具有灵敏度高,重复性好的特点,而且较少受到标本质量和检测人员主观因素的影响,特别是对于缺乏典型形态学和遗传学异常的长期不明原因血细胞减少的疑似MDS患者的鉴别诊断具有显著价值。但形态学上的病态造血,染色体及流式检测异常并非MDS所特有,而且MDS患者并不一定出现上述所有异常改变,MIC的综合诊断有助于MDS的确诊和除外诊断。