前言膀胱癌是我国泌尿系统最常见的恶性肿瘤，绝大多数来自移行上皮，这其中有80％是良性倾向的表浅癌，治疗后易复发，但复发后70-80％不发生肌层浸润和远处转移，预后较好，其余20-30％将进展为浸润癌。在初发即为浸润癌或复发后进展为浸润癌的患者中，50％于2年内发生远处转移，60％在首次治疗后5年内死亡。早期诊断膀胱癌并根据其生物学特点采取及时合理的治疗方法，提高膀胱癌患者的总体生存率，一直是泌尿外科学者研究的重要课题。而寻找对膀胱癌诊断敏感性高、特异性强，又方便快捷、经济的非侵入性新瘤标是研究的重要方向。近年来，人们认识到细胞凋亡在肿瘤发生、发展中的重要作用，开始了解膀胱肿瘤中的凋亡障碍，并试图将促进肿瘤细胞凋亡的一些方法应用于膀胱肿瘤的诊治。IAP家族主要通过对caspase（半胱天冬酶）活化通路下游环节的抑制而发挥阻断细胞凋亡的作用，survivin（生存素）是IAP（inhibitor of apoptosis protein凋亡抑制蛋白）家族成员之一，众多证据表明它参与了细胞分裂的调节、细胞周期的进程和细胞内的某些信号传导通路。随着我们对他了解的深入，survivin亦被作为一种恶性肿瘤诊断的标志物，并且它在多种恶性肿瘤中的高表达已成为生存期较短的独立的预后因子，生存素因其在人类恶性肿瘤中过表达、高选择性分布、特殊的抗凋亡作用等特性，特别是在肿瘤治疗方面的潜在价值使其倍受关注。初步的研究已经揭示，生存素与肿瘤的发生、发展和预后关系密切。。因此，作为一个极有前途的肿瘤治疗的标靶，针对于它的各种反意治疗及化疗药物的使用很有可能成为恶性肿瘤治疗的新途径。癌症治疗的失败主要是因为对化疗、放疗及免疫治疗的抵抗，在某种程度上也是caspase活化过程和细胞凋亡的失败。多种抗肿瘤药物是以诱导细胞凋亡来发挥作用，三氧化二砷作为一种新兴的抗肿瘤药物可以诱导细胞凋亡并在血液系统肿瘤的治疗中广泛应用，同时也对包括膀胱肿瘤在内的多种恶性肿瘤显示出治疗作用，但其确切的机制还未完全清楚。本研究旨在揭示生存素在膀胱移行细胞癌中的表达与肿瘤分期分级等因素的关系；探讨三氧化二砷诱导的膀胱肿瘤凋亡与生存素的关系。本研究对三氧化二砷与生存素的关系深入研究，将有利于肿瘤凋亡抑制机制的阐明，在肿瘤的诊断和治疗方面具有广阔的临床应用前景。方法组织部分：应用免疫组化技术（SABC法）检测行膀胱癌手术的72例患者，正常膀胱粘膜10例作为对照；细胞浆呈棕黄色为阳性标志，检测survivin在膀胱移行细胞癌中的表达，并分析其与肿瘤分期分级等因素的关系。细胞部分：在应用三氧化二砷处理耐药膀胱移行细胞癌株BIU-87后，用四甲基偶氮唑蓝法（MTT）测细胞增殖、用流式细胞术测细胞凋亡、细胞周期、survivin表达等指标的变化。结果survivin正常膀胱粘膜无表达；而癌组织中表达率较高47.2％，survivin主要分布于胞浆：survivin在T_is¹40例T_2⁴32例中的表达率分别为35.0％，62.5％。在浅表型和浸润型膀胱癌组织中的表达差异明显。survivin在G₁25例，G₂32例，G₃15例中的表达率分别为28.0％，46.9％，80.0％。在各分化级别膀胱癌组织中的表达差异明显。survivin的表达水平与膀胱癌患者的年龄、性别均无明显关系三氧化二砷使BIU-87细胞生长受到明显的抑制，且其抑制程度具有时间和浓度依赖性。三氧化二砷作用BIU-87细胞后，FCM凋亡分析显示，各组凋亡细胞百分比及SubG₀／G₁期与对照组比较增多，均差异显著。DNA含量分析显示，未处理的BIU-87细胞周期G₀／G₁期细胞所占比例相对较少：而三氧化二砷作用后，G₂／M期细胞所占比例减，G₀／G₁期细胞比例显著性增多，其改变呈浓度依赖性。FCM检测三氧化二砷作用后BIU-87细胞survivin抗原表达呈浓度依赖性减少。结论1．survivin在正常膀胱粘膜无表达，而癌组织中表达率较高。2．survivin与膀胱癌病理T分期的关系密切。在浸润癌中的表达高于浅表癌。3．survivin与癌分化程度的关系密切，在高、中分级癌组织中的表达高于低分级癌。4．survivin的表达水平与癌患者的临床特征无明显关系。5．三氧化二砷对BIU-87细胞生长的抑制程度具有时间和浓度依赖性。6．三氧化二砷促进BIU-87细胞的凋亡，对BIU-87细胞凋亡及周期的影响呈浓度依赖性。7．三氧化二砷对BIU-87细胞survivin抗原表达的影响呈浓度依赖性减少。