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组织因子(Tissue factor, TF)为一含有263个氨基酸残基的膜糖蛋白,是体内凝血反应中重要的始发者。近年来研究表明组织因子在急性冠脉综合征的发生发展中起重要的作用。动脉粥样斑块中TF的含量及活性显著高于正常动脉壁,并且不稳定性心绞痛或心梗患者的动脉壁TF含量明显高于稳定性心绞痛患者的动脉壁TF含量。然而,TF在动脉粥样硬化过程中表达水平增高的机制尚不完全清楚。高迁移率族蛋白-1(HMGB1)是一类非组蛋白染色体结合蛋白,正常情况下在细胞核内参与稳定染色质结构和基因的转录调控。新近研究表明,HMGB1一旦释放到细胞外即成为了一种重要的炎性细胞因子,介导多种炎症性疾病和危重病的发生发展,如内毒素血症、脓毒症等。最新研究发现动脉粥样斑块内存在大量的细胞外HMGB1,但这些细胞外HMGB1是否能刺激粥样斑块内细胞表达TF,目前尚未有相关报道。本研究首先观察了HMGB1对血管内皮细胞和巨噬细胞TF以及组织因子途径抑制物(TFPI)的表达的影响；然后探讨了哪种或哪几种受体参与了HMGB1上调TF表达；最后从细胞及分子水平深入探讨HMGB1上调TF表达的分子机制。主要的实验结果如下：1. HMGB1对TF及TFPI的表达的影响：Western-blot结果显示：HMGB1能刺激血管内皮细胞表达TF,并呈剂量依赖性和时间依赖性；而TFPI的表达水平在HMGB1刺激后无明显变化。实时定量PCR显示：HMGB1刺激能导致血管内皮细胞和巨噬细胞中TF mRNA表达水平升高,提示HMGB1能在转录水平上调TF的表达。TF活性分析结果表明：HMGB1刺激能上调血管内皮细胞和巨噬细胞中TF的活性,与蛋白水平的增高相一致。此外,实时定量PCR和TF活性分析结果显示：内毒素脂多糖(LPS)中和制剂——多性霉素B(PMB)能显著抑制LPS所致的TF表达升高,但不能显著抑制HMGB1上调TF的表达,表明HMGB1蛋白刺激TF表达与LPS污染无关。2. HMGB1作用于血管内皮细胞并上调TF表达的受体类型：采用HMGB1的三种受体(TLR4、TLR2和RAGE)的特异性抗体分别阻断细胞膜上的相应受体,通过观察是否能抑制HMGB1刺激TF的表达,来判断哪种或哪几种受体参与了HMGB1上调TF表达。实时