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目的:以中医“肾藏精,精生髓”为理论基础,基于GRP78/CAMKⅡ信号途径,探讨六味地黄丸含药血清对Aβ1-42诱导SH-SY5Y细胞内质网应激的影响,揭示六味地黄丸防治阿尔茨海默病的可能作用机制。材料与方法:六味地黄丸含药血清制备:30只大鼠随机分为正常组及六味地黄丸组,六味地黄丸组大鼠采用生药质量浓度为1.18g﹒kg-1﹒d-1六味地黄丸(浓缩丸)水溶液灌胃,连续5日,每日2次,末次2h后取血,提取六味地黄丸含药血清,正常组大鼠相同条件下双蒸水灌胃,提取正常组血清;本实验分为3组:空白对照组、模型组及六味地黄丸含药血清组,空白对照组与模型组采用含10%正常组大鼠血清DMEM高糖培养基培养,六味地黄丸含药血清组采用含10%六味地黄丸组大鼠含药血清DMEM高糖培养基培养,模型组及六味地黄丸含药血清组加入终浓度为20umo L﹒L-1 Aβ1-42寡聚体,继续培养48h后检测;乳酸脱氢酶试剂盒检测细胞培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活力;透射电镜检测SH-SY5Y细胞的内质网超微形态结构变化情况;采用实时荧光定量核酸扩增检测系统(Real-time PCR Quantitative Detecting System,QPCR)检测各组GRP78、CAMKⅡm RNA表达水平;采用Western Blot法检测各组GRP78、CALM、CAMKⅡ蛋白表达水平。结果:1.各组细胞培养基中LDH活力的变化情况:与空白对照组相比,模型组细胞培养基中的乳酸脱氢酶活力显著增高(p<0.01);与模型组相比,六味地黄丸含药血清组细胞培养基中的乳酸脱氢酶活力明显降低(p<0.05)。2.透射电镜下观察各组细胞超微形态结构变化情况:空白对照组细胞结构清晰,双层核膜及胞质膜形态完整,内质网形态正常,结构明显;与空白对照组相比,内质网明显扩张,呈空泡状;与模型组相比,六味地黄丸含药血清组细胞接近正常细胞形态,内质网扩张情况明显减轻。3.QPCR检测各组细胞GRP78、CAMKⅡm RNA表达结果:与空白对照组相比,模型组细胞CAMKⅡm RNA表达水平显著降低(p<0.01),GRP78 m RNA表达水平显著升高(p<0.01);与模型组相比,六味地黄丸含药血清组细胞CAMKⅡm RNA表达水平显著升高(p<0.01),GRP78 m RNA表达水平明显降低(p<0.05)。4.Western Blot检测各组细胞GRP78、CALM、CAMKⅡ蛋白表达结果:与空白对照组相比,模型组细胞CAMKⅡ蛋白表达水平显著降低(p<0.01),GRP78、CALM蛋白表达水平显著升高(p<0.01);与模型组相比,六味地黄丸含药血清组细胞CAMKⅡ蛋白表达水平显著升高(p<0.01),GRP78、CALM蛋白表达水平显著降低(p<0.01)。结论:1.六味地黄丸含药血清可有效改善Aβ1-42诱导SH-SY5Y细胞内质网应激出现的损伤情况。2.六味地黄丸含药血清可能通过调节GRP78、CALM、CAMKⅡ的基因表达进而发挥改善细胞内质网应激及下游钙离子通道的作用。