辣根过氧化物酶反应过程的化学动力学解析

来源 :同济大学理学院 同济大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hushengming1
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辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)是一种应用范围十分广泛 的酶试剂,已被应用于化学、生物、医药、食品等许多领域。在环境化学方面, 已有一些HRP处理水中酚类化合物的相关研究,如反应条件优化、不同底物酶 反应的动力学参数测定、对不同底物去除率的比较等。由于HRP在参与氧化反 应过程中,真正起氧化作用的是HRP与H202及底物反应产生的两种中间体化 合物HRP-Ⅰ和HRP-Ⅱ,因此有关HRP中间体化合物的研究一直是个热点。但 由于HRP-Ⅰ和HRP-Ⅱ与底物反应迅速,其信息难于捕捉,又给这方面的研究带 来一定困难。 本文选用HRP催化氧化苯酚聚合这一反应体系为研究对象。在实验的基础 上引入化学计量学方法解析实验数据,最终得到了令人较为满意的结果。首先 我们设计HRP分别与不同浓度的H2O2和苯酚反应,以便于观察HRP中间体的 信息。然后采用停流快速混合技术,利用快速扫描紫外可见分光光度计得到HRP 催化H2O2氧化苯酚聚合过程的瞬态光谱数据。最后在数据的处理过程中通过尝 试潜变量投影(HELP)、目标试验因子分析(TTFA)、正交投影(OP)、遗传 算法(GA)等多种化学计量学算法后,经过对用各种方法处理数据得出结果的 分析,我们采用OP解析测量数据矩阵,确定体系中产生紫外可见吸收的物种 数,及HRP中间体化合物HRP-Ⅰ、HRP-Ⅱ的纯光谱信息,进而用优化算法GA 解出反应过程中各组分的动力学曲线。 此结果很好的说明了HRP催化氧化苯酚聚合反应中HRP与其中间体化合 物之间的转化过程,有助于我们更加深入的理解HRP催化氧化酚类化合物反应 的过程,为HRP在环境化学方面的应用提供了理论依据。
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