毛白杨剥皮再生过程中基因表达差异及差异基因功能分析

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoxiao_666
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本实验室前期基因表达研究结果表明,14个基因可能在杨树木材形成中起作用,本项研究利用已建立的杨树剥皮再生研究系统,运用实时荧光相对定量技术(Real-TimeQuantitativePCR,RQ-PCR),观察每个基因在不同剥皮时期(0、6、10、12、14、16、18、22d)的基因表达差异,并结合不同剥皮时期的组织解剖学观察结果,对它们参与的具体过程做初步探讨。对上述研究中沉默后可能获得易于观察表型的基因,利用RNA干扰技术获得转基因植株,通过组织解剖学观察,鉴定其在次生维管系统再生中的作用。通过本研究,期望能为找到决定木质部细胞分化的关键调控基因做初步的探索,从而为利用基因工程改良树木材性奠定基础。 本研究主要包括两部分研究结果。第一部分:利用实时荧光相对定量PCR技术(Real-TimeQuantitativePCR,RQ-PCR),确定细胞分裂始终贯穿在整个剥皮再生过程,并且在剥皮后12、16d出现细胞分裂高峰。对14个基因相对定量结果并结合http://www.populus.db.umu.se/上的预测功能,初步认为其中5个基因参与了细胞生长过程;5个基因参与了细胞分裂过程;2个基因参与了细胞分化过程;2个基因参与了核酸代谢过程。第二部分:上述结果表明,A005p54对应的基因在形成层分化时期参与了细胞分裂的调控,通过构建dsRNA表达载体,农杆菌侵染杨树,获得转基因杨树,解剖学观察结果表明,A005p54对应的基因表达量下降,细胞分裂减缓。
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