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研究目的:1.观察SATB2在人口腔鳞癌标本中的表达,评价SATB2的表达水平及口腔鳞癌临床病理及预后的关系;2.检测SATB2对口腔鳞癌细胞HN4细胞系生物学行为的影响;3.SATB2/NOX4和IL-6/JAK-STAT3信号通路在口腔鳞癌增殖中相关机制的初步研究。材料与方法:1.检测58例口腔鳞癌患者组织样本中SATB2蛋白的表达、并分析其表达量与患者临床病理学指标及预后的关系;2.采用western blot和real-time PCR技术检测口腔鳞癌细胞系及新鲜头颈鳞癌组织、癌旁组织中SATB2蛋白及mRNA的表达;构建能够过表达SATB2的慢病毒载体 Lenti-CMV-SATB2-IRES-eGFP-PGK-Puro 转染口 腔鳞癌 HN4 细胞,研究SATB2的表达升高对于细胞体内外生物学行为的影响:CCK-8、流式检测细胞周期等方法体外检测上述SATB2蛋白过表达后HN4细胞的增殖能力的改变;划痕实验、Transwell侵袭小室等方法体外检测上述SATB2蛋白过表达后HN4细胞的迁移、侵袭能力的改变;裸鼠荷瘤模型检测SATB2蛋白过表达后HN4细胞成瘤能力的改变。3.采用Western blot检测SATB2蛋白过表达前后,检测其信号转导通路中的蛋白IL-6表达量、STAT3的磷酸化水平,EMT相关分子E-cadherin,Vimentin等蛋白表达情况。应用RT-PCR、Western blot、CHIP等实验方法,研究SATB2在HN4细胞中发挥促癌作用的潜在机制。结果:1.高表达SATB2与患者肿瘤大小、颈部淋巴结转移、临床分期和不良预后相关,具有统计学意义(P<0.05)。2.验证慢病毒载体 Lenti-CMV-SATB2-IRES-eGFP-PGK-Puro 转染至 HN4 细胞系中的效率。体外实验结果显示,过表达SATB2之后,HN4细胞增殖、迁移及侵袭能力均显著增强;体内实验结果显示,SATB2明显增强HN4细胞成瘤能力。3.慢病毒过表达SATB2后,EMT相关分子E-cadherin,Vimentin蛋白水平发生变化,IL-6/JAK-STAT3明显被激活;生物信息学分析表明,SATB2蛋白能够调节NADPH氧化酶4型(NADPHOxidase4,NOX4)基因表达,利用小干扰RNA敲低NOX4表达后,细胞在体内外的增殖能力均下降,细胞周期被阻滞在G1期;提示SATB2可能通过调控STAT3和NOX4两条途径介导细胞的增殖。结论:SATB2在口腔鳞癌患者组织样本中的呈高表达,与肿瘤的病理分级、临床分期、淋巴结转移及患者的生存率密切相关,可以作为预后预测的候选生物标记物;其次,过表达SATB2能促进HN4细胞的增殖,可能通过介导使STAT3磷酸化、上调NOX4表达两条途径实现,促使HN4细胞中发生EMT,促进其迁移、侵袭。SATB2在口腔鳞癌中作为一种促癌基因,可作为潜在治疗靶标,为开发新疗法提供理论基础。