鸽源NDV基因序列分析及免疫原性的初步研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yijixu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为了解近年来广东省鸽源NDV流行毒株的生物学特性、分子流行病学特点,并为制定有效防控措施提供理论依据。本研究对本实验室自1999-2008年从广东省分离到的21株鸽源NDV分离株进行了部分生物学特性测定、F和HN序列分析及毒株间交叉免疫保护试验的研究。   对21株鸽源NDV分离株的IVPI、ICPI和MDT研究结果表明,各分离株间的致病指数存在一定程度的差异。综合3项致病指数对各毒株毒力进行判定,Pi54株、Pi93株、Pi107株和Pi113株属于中发型毒株;Pi14株和Pi109株属于缓发型毒株;其余毒株的3项指数均不统一,无法进行判定,还需进一步结合动物致病性试验给予判定。   利用RT-PCR技术,成功地扩增出了21株鸽源NDV的F和HN全基因序列。各毒株的F基因ORF全长为1662bp,HN基因ORF全长为1716bp和1734bp两种,大部分的毒株HN基因ORF全长为1716bp,只有Pi101株、Pi102株、Pi103株、Pi109株和Pi114株HN基因ORF全长为1734bp。序列分析表明21株鸽源NDV的F蛋白裂解位点序列分为112RRQKRF117、112GRQGRL117、112KRQKRF1173种,112RRQKRF117和112KRQKRF117符合NDV强毒株的分子特征,112GRQGRL117符合NDV弱毒株的分子特征,但其裂解位点并没有与其毒力完全相一致。F和HN蛋白的潜在糖基化位点和半胱氨酸残基位点都比较保守,但Pi55株的HN蛋白在414位多1个半胱氨酸残基,Pi103株的HN蛋白在359位多1个半胱氨酸残基。系统进化树显示Pi93株、Pi101株、Pi102株、Pi103株Pi109株、Pi111株、Pi114株为基因Ⅱ型,与B1、Clone30和Lasota亲缘关系最近;Pi14株、Pi17株、Pi54株、Pi55株、Pi113株为基因Ⅶd型,与广西鸽源分离株Gxp40亲缘关系最近;Pi11株、Pi100株、Pi104株、Pi105株、Pi106株、Pi107株、Pi108株、Pi110株和Pi112株属于基因Ⅵb型,与国外鸽源NDV流行株遗传亲缘关系最近。检测结果显示我国鸽源NDV的基因型由最初单一的基因Ⅵ型变成了以基因Ⅱ、Ⅵ和Ⅶ型共存的形式。F和HN全基因序列的核苷酸和推导的氨基酸相似性比较显示,除基因Ⅱ型的分离株,其他分离株与疫苗株Mukteswar株、Lasota株和B1株的相似性相对较低。   对本研究中21株鸽源NDV分离株、Mukteswar株和La Sota株进行交叉血凝抑制试验。结果表明各毒株之间存在一定的抗原差异性,其中Pi110株、Pi111株和Pi113株的血清对各毒株的HI效价平均值较高,平均值分别为7.0log2、8.1log2和7.1log2,而Mukteswar株和La Sota株的血清对各毒的HI效价较低,平均值在3.5log2以下,比Pi110株、Pi111株和Pi113株的交叉HI效价平均值低了3log2。Pi110株、Pi111株、Pi113株和La Sota的交叉免疫保护试验表明,Pi110株、Pi111株、Pi113株灭活疫苗组和La Sota活疫苗组对3种不同毒株的攻击能提供较高的保护,当HI抗体效价达到8log2时保护率可达到90%(27/30),也说明了Lasota疫苗能够对现有的鸽源NDV的提供保护。
其他文献
期刊
期刊
在庆祝人民空军成立60周年之际,为进一步推动深入学习实践科学发展观活动,全面贯彻落实新修订的《军队基层建设纲要》,在新的起点上推进空军部队建设科学发展,空军党委召开了
期刊
期刊
期刊
期刊
期刊
期刊
期刊