随着人们生活节奏加快,生活水平不断提高,桶装水凭借其方便、快捷和卫生等优点,快速进入了千家万户及办公场所。这种现象,在刺激市场经济的同时,也存在卫生隐患,主要是桶装水从饮水机中流出后,受到饮水机内胆的污染,水中细菌总数严重超标。生物被膜在自然界中无处不在,它广泛存在于含水或潮湿的各种表面上,包括自来水管道、工业热交换系统,下水道以及病理状态下的各种生物体的组织器官等,它不仅可以通过残留、接触的方式引起污染,还可通过散播微生物或微生物团形成微生物气溶胶的方式污染整个生态,在食品加工生产中会污染食品,给企业带来经济损失,给消费者的健康带来危害。本研究旨在了解桶装水二次生物污染的现状;从饮水机内胆上分离和筛选形成生物被膜的细菌,对生物被膜引发桶装水二次污染的可能性进行探索;对饮水机内胆优势生物被膜细菌进行了PCR鉴定和成膜能力的研究。为桶装水二次污染提供理论依据。目前国内外对细菌生物被膜的研究主要集中在医学领域,且研究尚不成熟,对于生物被膜引起的食品污染认识还不是很深。所以对桶装饮用水二次生物污染的研究很有必要。本试验主要从以下几个方面对细菌生物被膜进行探索,主要的研究内容与结果如下:1、为了解桶装水污染现状。随机选取了医院、办公室、教学楼、家庭、寝室等五个不同环境的饮水机20台为调查对象,采用GB/T4789.2—2003《食品卫生微生物学检验》菌落总数测定方法对饮水机内胆及冷水中的细菌总数进行检测,冷水按照GB 19298—2003《瓶(桶)装饮用水卫生标准》进行评价,内胆按照GB9663—1996《旅店业卫生标准中的茶具标准》进行评价,并按照《饮水机卫生状况调查表》进行调查,结果显示:细菌总数都超标,最少的超标30倍,高的上700倍,50%的家庭和寝室用户有消毒饮水机的习惯,但清洗消毒时间间隔是两个星期以上,公共环境如办公室、教学楼等的饮水机存在半年清洗一次或者无人清洗的现象,桶装水二次污染主要是由于饮水机内胆长期不清洗所导致。2、为了解桶装水开盖后的保质期,采用GB/T4789.2—2003《食品卫生微生物学检验》菌落总数测定方法,研究了饮水机内胆消毒后,冷水细菌总数随饮用时间的变化规律,结果得出:桶装水开盖后保质期该控制在5天之内,最好前3天饮完,最好每次换水之前都对饮水机进行清洗消毒。3、采用镀银染色法对从饮水机内胆上筛选分离出的细菌进行了生物被膜定性分析,分离筛选出7株产生物被膜的细菌,通过对7株生物被膜细菌进行微孔板检测法定量分析和镀银染色法定时检测,筛选出一株优势生物被膜菌。4、运用现代生物技术PCR方法结合少量的生化实验对细菌进行快速鉴定,实验最终鉴定出优势菌为植生克雷伯菌。5、研究了植生克雷伯菌在不同营养条件形成的生物被膜的粘附能力。植生克雷伯菌形成生物被膜的最适温度是31℃,葡萄糖、蔗搪、麦芽糖、乳糖对生物被膜的形成有促进作用。氮源中尿素对植生克雷伯菌生物被膜的形成也有促进作用,其它氮源几种影响效果不明显。