论文部分内容阅读
本文于2004年6月到2005年12月对宁波象山港养殖区域浮游细菌、浮游病毒、以及蛭弧菌生物量分布进行采样调查，并比较了几种染色法用于计数细菌生物量的优缺点；同时本文还对免疫多糖对黄鳝的免疫增强作用进行了研究，结果如下： 1．用DAPI染色法对纯培养的菌株0503和0501进行染色并计数，结果显示，DAPI染色法计数结果与细胞计数板法和平板涂布法结果非常接近，DAPI染色的细菌背景突出，计数方便。同时运用这几种方法对宁波象山港养殖区海水细菌总量进行计数，结果显示，海水、塘水、塘泥Zobell培养基计数结果分别为3.75×10~4cfu／ml、3.2×10~4cfu／ml、1.15×10~5cfu／g；DAPI染色计数结果分别为1.44×10~7cells／ml、1.16×10~7cells／ml、5.56×10~7cells／g；两种计数结果存在数量级上的差异。从DAPI染色效果来看，虽然海水中细菌大小不一，但是均可形成鲜明的亮点而从背景中突出，因此，检出度更高。 2．对宁波象山港养殖区四个采样点浮游病毒和浮游细菌生物量进行采样调查，结果显示，秋季浮游细菌生物量在10~5～10~7cells／ml数量级之间，而浮游病毒生物量无论池塘还是海湾均在10~5cells／ml数量级；冬季浮游细菌生物量在10~5～10~6cells／ml数量级之间，而浮游病毒生物量无论池塘还是海湾均为10~4cells／ml数量级。与以往报道相比，浮游病毒丰度并不算高。 3．通过以海水养殖动物病原菌为靶细菌在象山港养殖水域成功诱导分离到各种蛭弧菌，开展了蛭弧茵、弧菌、异养细菌季节生态分布特征研究。研究结果表明，不同种类或同种不同菌株宿主其所对应的敏感蛭弧菌数量呈现明显差异，副溶血弧菌敏感蛭弧菌检出率(数值)最高。同一宿主检测出的敏感蛭弧菌在近岸海水、池塘水及底泥中的分布呈现差异，其分布特征与异养细菌、弧菌的分布特征呈正相关。近岸海水中异养细菌和弧菌总数均高于塘内海水；虾塘表泥中异氧细菌和弧菌总数均高于近岸海水和池塘海水中细菌数量；夏季各种细菌数量最高，冬季最低。蛭弧菌的最适生长温度为25～30℃。 4．在饲料中添加不同剂量的免疫多糖(酵母细胞壁)，连续投喂经注射接种嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)的黄鳝(Monopterus albus)28d后，通过测定供试黄鳝的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性(SGPT)、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率(RPS)，探讨了将LPS作为免疫原、免疫多糖作为免疫刺激