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目的研究PSI处理后PC12细胞的硝化、磷酸化和糖基化亚蛋白质组的变化,筛选出新的与PD、UPS相关的被异常修饰的蛋白,为PD的病因病理和临床治疗研究提供新的思路。方法建立PSI诱导的PC12细胞PD模型,提取细胞总蛋白,分别采用1)双向电泳、Western blot与质谱相结合的硝化亚蛋白质组学技术,2)双向电泳、Pro-Q Diamand磷酸化蛋白凝胶染色与质谱相结合的磷酸化亚蛋白质组学技术,3)双向电泳、Pro-Q Emerald 488糖基化蛋白凝胶染色与质谱相结合的糖基化亚蛋白质组学技术,获得差异蛋白点,并鉴定出差异蛋白。结果PSI处理后PC12细胞凋亡百分比为10%,大约在80%的细胞中诱导出包涵体;12个蛋白点的相对硝化水平发生显著改变,CCT 6a、lamin A、p60 protein和G3BP显著升高;24个蛋白点Pro-Q Diamand染色强度发生显著改变,分别为上调的TH、peripherin、p47和HSP27,以及下调的NPM和AR,同时TH、peripherin和HSP27的相对磷酸化水平显著升高,p47、NPM和AR的相对磷酸化水平显著下降;12个蛋白点Pro-Q Emerald 488染色强度发生显著改变,分别为上调的ORP150和annexin II,以及下调的p-ALDH,ORP150的相对糖基化水平显著升高,p-ALDH的相对糖基化水平显著下降,annexin II的相对糖基化水平无变化。讨论本研究成功地建立了蛋白酶体抑制的PD细胞模型,比较蛋白的硝化、磷酸化和糖基化水平的变化,分别探讨差异蛋白及其相关异常修饰在PD及PSI诱导的PC12细胞PD模型中可能的作用。本研究发现的CCT 6a、p60、lamin A、G3BP蛋白及其硝化修饰,p47、AR和NPM蛋白及其磷酸化修饰,annexin II蛋白及其糖基化修饰在以往关于PD的研究中均未被报道过,本研究也首次发现磷酸化的TH和HSP27、糖基化的ORP150和p-ALDH在蛋白酶体受到抑制后发生显著变化。这些发现为进一步阐明PD的发病机制和寻求PD药物治疗靶点提供了新的线索。