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多梳家族(Polycomb group,PcG)基因是一类进化上高度保守的转录抑制因子,其可通过抑制相关基因的转录表达,调控许多重要的生命活动过程。SOP-2是秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)中多梳复合体1(Polycomb related complex1,PRC1)的组成成分,sop-2基因突变会引起线虫体内Hox基因的异常表达,同时SOP-2在线虫细胞核内会形成被称为“SOP-2小体”的蛋白质聚集体,这些SOP-2小体的形成与其生理功能的正常发挥相关,而目前对于线虫体内SOP-2小体形成的机制仍不清楚。
近来研究发现,蛋白质可以通过液体-液体相分离(Liquid-liquid phase separation,LLPS)方式介导形成聚集体。相分离发生的过程是由蛋白质结构域或者分子间的相互作用力驱动,亦或者通过固有无序区域(Intrinsically disordered region,IDR)介导发生,这些分子间的相互作用力强度可被温度、离子强度、相分离产物的组成以及蛋白浓度等多种因素调节,同时翻译后修饰(Post-translational modifications,PTMs)过程(包括磷酸化、甲基化、乙酰化、泛素化、类泛素化)也会调节蛋白与蛋白间或者蛋白与RNA分子间的相互作用力强度。且最初形成的液态蛋白质凝聚物可逐渐转变成凝胶状,甚至最终成为固态聚集体。
在本研究中证明了线虫细胞核内SOP-2小体具有类似液体的性质。SOP-2蛋白结构中包含一个固有无序区域以及一个SAM结构域,单独的SOP-2固有无序区域(SOP-2(IDR)在体外可发生相分离,发生相分离的SOP-2(IDR)液滴表现出一系列例如融合及浸润等类似液体的性状,且相变微滴的形成受到离子强度、温度等因素的影响。通过荧光漂白恢复实验(FRAP)还发现随时间推移SOP-2(IDR)相分离沉淀物会逐渐转变为凝胶状,RNA以及SAM结构域会调节SOP-2(IDR)相分离的过程,而类泛素化修饰作用(Sumoylation)可促进SOP-2在体外的相分离过程,同时也会影响线虫体内SOP-2小体的形成。
综上所述,我们的研究揭示了PcG蛋白SOP-2可发生相分离,且由SAM结构域介导的二聚化、翻译后修饰的类泛素化作用以及相关RNA会调控这个相分离发生的过程。
近来研究发现,蛋白质可以通过液体-液体相分离(Liquid-liquid phase separation,LLPS)方式介导形成聚集体。相分离发生的过程是由蛋白质结构域或者分子间的相互作用力驱动,亦或者通过固有无序区域(Intrinsically disordered region,IDR)介导发生,这些分子间的相互作用力强度可被温度、离子强度、相分离产物的组成以及蛋白浓度等多种因素调节,同时翻译后修饰(Post-translational modifications,PTMs)过程(包括磷酸化、甲基化、乙酰化、泛素化、类泛素化)也会调节蛋白与蛋白间或者蛋白与RNA分子间的相互作用力强度。且最初形成的液态蛋白质凝聚物可逐渐转变成凝胶状,甚至最终成为固态聚集体。
在本研究中证明了线虫细胞核内SOP-2小体具有类似液体的性质。SOP-2蛋白结构中包含一个固有无序区域以及一个SAM结构域,单独的SOP-2固有无序区域(SOP-2(IDR)在体外可发生相分离,发生相分离的SOP-2(IDR)液滴表现出一系列例如融合及浸润等类似液体的性状,且相变微滴的形成受到离子强度、温度等因素的影响。通过荧光漂白恢复实验(FRAP)还发现随时间推移SOP-2(IDR)相分离沉淀物会逐渐转变为凝胶状,RNA以及SAM结构域会调节SOP-2(IDR)相分离的过程,而类泛素化修饰作用(Sumoylation)可促进SOP-2在体外的相分离过程,同时也会影响线虫体内SOP-2小体的形成。
综上所述,我们的研究揭示了PcG蛋白SOP-2可发生相分离,且由SAM结构域介导的二聚化、翻译后修饰的类泛素化作用以及相关RNA会调控这个相分离发生的过程。