Bt基因转化甘蓝的研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liug1001
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该实验将Bt基因通过农杆菌介导的方法转化结球甘蓝,主要结果如下:1.甘蓝的再生体系的建立:4个供试材料的种子的无菌苗的子叶柄和下胚轴在附加3mg/L 6-BA、0.05mg/LNAA的MS培养基上诱导不定芽发生的频率3﹪-84﹪.子叶的分化频率较低,在3﹪-8﹪之间,下胚轴的分化频率较高,在61﹪-84﹪之间.不同苗龄的下胚轴对芽分化率的影响也很大,以无菌苗6-7d龄苗的下胚轴切段得到较高的芽分化频率.2.农杆菌介导的甘蓝下胚轴转化体系的建立:不同基因型之间,转化频率相差很大,中甘8号获得Km芽频率较高(5.1﹪),而牛心甘蓝却没有得到1株Km芽,早秋也很难获得转化芽,Km芽的频率仅为0.7﹪.看护培养可使烟草的转化效率提高,该实验结果表明,烟草悬浮细胞看护培养对提高甘蓝的转化频率影响不大.3.转基因甘蓝的鉴定:提取Km抗性的植株的植物基因组DNA,对转基因植株进行了PCR扩增和PCR-Southern blotting分析,共获得转Bt基因的植株12株.
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