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单克隆抗体（mAb）的纯化是其理论研究和临床应用的基础,文献报道的纯化方法较多,包括各种沉淀法、离子交换层析法（IEX）、固定化金属螯合亲和层析法（IMAC）、凝胶层析法（GF）、羟基磷灰石层析法（CHT）、疏水作用层析法（HIC）和亲和层析（AC）法等,但各种方法的适用性及其规律至今尚需进一步研究。本文选择gp130、CD28和CD80三种鼠抗人mAb作为研究对象,采用IEX、IMAC、CHT、GF、AC、（NH4）2SO4沉淀、辛酸沉淀等方法对上述三种小鼠腹水来源的mAb的纯化进行了比较性研究,在此基础上进一步从纯化后的抗体纯度、回收率和生物学活性等方面对多种不同纯化方法进行了分析,并优化了实验条件,从而建立了可获得高纯度、生物学活性好和纯化过程易于放大的mAb纯化方法,为其理论研究和临床应用提供了必要的实验基础。具体如下: 1.离子交换一步法快速纯化gP130激发型单克隆抗体B-S12的研究 采用中高压层析仪（Biologic Duo-Flow）和阴离子交换层析柱（Uno Q1或Bio-Scale Q5）,建立了从小鼠腹水中纯化抗gp130 mAb B-S12的一步层析方法。 本论文分别研究了上样pH值和离子强度梯度洗脱等条件对mAb B-S12纯度的影响,结果表明:经预处理后的样品以Tris-HCl缓冲溶液（pH7.0,20mmol/l）稀释10倍后上Uno Q1柱,0-0.5mol/l NaCl 10柱体积（CV）梯度洗脱,可获得纯度大于95%的mAb B-S12,抗体回收率达66%,纯化后的抗体在体外对XG-2细胞有明显的促增殖作用。同时,采用Bio-Scale Q5层析柱对本方法的放大可行性进行了研究,结果令人满意。 在方法筛选、优化过程中,比较了阴离子交换一步层析法（AIEX）、阳离子交换一步层析法（CIEX）以及ProteinG AC法在纯度、回收率和生物学活性等方面的差异。结果表明:虽然CIEX一步层析法也能获得纯度较高的mAb B-S12（纯度90%）,但纯度和回收率（52%）均不如AIEX一步法。而ProteinG AC法,虽然其纯化后的抗体纯度较高（>90%）,但其在体外对XG-2细胞的促增殖作用均低于