论文部分内容阅读
刺山柑Capparis spinosa L.属白花菜科(capparidaceae)山柑属(capparis)植物,又名老鼠瓜、瓜儿菜、野西瓜、槌果藤、抗旱草,维语称“卡盘”或“波里克果”等。作为传统维药,在新疆地区使用已有数千年历史,具有祛风、除湿、通鼻窍、祛瘀止痛活血的作用,临床上常用于类风湿关节炎、肩周炎、痛风、皮肤病的治疗。课题组在前期研究中,明确了刺山柑果实提取物具有抗类风湿关节炎的生物学活性,确定了活性部位提取工艺。活性部位主要由吲哚类、黄酮类和酚酸类化合物组成,含量占活性部位50%以上。本论文是在以上研究基础上,基于网络药理学理论和方法,开展刺山柑果实提取物抗类风湿关节炎(RA)的作用机制研究,为刺山柑果实活性部位创新药研发提供参考和科学依据。从活性部位选取银杏黄素、吲哚-3-甲醛和对羟基苯甲酸等3个代表性化合物,运用多种数据库和软件,对3个化合物进行靶点筛选,治病基因查找和RA通路的富集,采用网络药理学的方法构建成分-基因-通路网络,经网络分析得到得到与RA相关靶点77个,基因65个,通路53个。刺山柑果实提取物主要涉及8个靶点:NFκB1、FOSB、VEGFA、RELA、PLCG1、EGFR、TP53、RXRA。其中NFκB1、PLCG1为重要的抗RA活性靶点,涉及5条信号通路,分别为Wnt signaling pathway、NF-κB signaling pathway、MAPK signaling pathway、JAK/STAT signaling pathway、PI3K-Akt signaling pathway、Calcium signaling pathway。通过细胞模型考察发现,化合物银杏黄素抑制NF-κB活性的IC50为7.5μM左右。通过对给药大鼠血清内AA的发病因子TNF-α,IL-1β、IFN-γ水平的检测发现,刺山柑果实活性部位能降低TNF-α,IL-1β、IFN-γ等炎症因子的表达水平。实验结果初步验证了网络预测分析的准确性。本研究首次应用网络药理学研究对刺山柑果实活性部位抗类风湿关节炎的作用机制进行初步研究,从预测、分析角度,阐明了刺山柑果实提取物治疗类风湿关节炎的潜在作用机制。