半胱胺对饲喂高脂日粮小鼠抗氧化能力和血脂的影响

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饲料中添加过高剂量油脂,其能量利用率较低,长期饲喂还会引起高血脂、肥胖等相关疾病;研究发现,高脂日粮易引起氧化应激,油脂的氧化可能是影响饲料利用率和导致高血脂的重要原因。本论文着重研究了高脂日粮中添加半胱胺,对动物机体抗氧化能力和血脂的影响,并初步探讨了半胱胺与清除自由基,保护肝细胞DNA完整性,及其与ATPase活性的关系。KM断奶雄性小鼠(17.28g左右)90只,分为9组,在基础日粮及高脂日粮(添加4%、8%猪油)基础上,分别添加0、24、48mg/kg半胱胺,饲喂90天。实验观察到:连续饲喂高脂日粮会降低小鼠机体的抗氧化能力,提高血脂含量。在日粮中添加24、48mg/kg半胱胺可提高小鼠血清和肝、肠匀浆液中超氧化岐化酶活性和谷胱甘肽含量,提高小鼠血清和肝、肠组织的O2-和OH·自由基清除率和总抗氧化能力,降低丙二醛含量。并且,高脂日粮中添加半胱胺能降低T-CHO和LDL,提高HDL。分析得到血清中总胆固醇与肝脏的总抗氧化能力存在显著的负相关关系(P<0.01),相关系数为-0.823。建立小鼠肝细胞氧化模型,通过给小鼠原代肝细胞添加油酸至终浓度为0、50、100、150、200、250μmol/L,以ROS生成量和谷胱甘肽含量为主要指标,以ATPase活性和丙二醛产物为次要指标,得到建立氧化模型的油酸添加量为150μmol/L。选取油酸添加0、150、250μmol/L,同时添加CS至终浓度为0、50、100、150、200、250、300、350、400、450、500μmol/L。实验表明,少量添加半胱胺能显著提高谷胱甘肽含量,清除ROS,降低脂质过氧化产物丙二醛,提高细胞中ATPase活性;且随着油酸添加量的增加,半胱胺最佳清除ROS添加量与ATPase活性提高程度也随之增加,ROS清除率最大为78.35%,ATPase活性最大提高了116.58%。但半胱胺添加量大于350μmol/L时,对小鼠肝细胞抗氧化能力的提高不利。通过对肝细胞培养液中添加油酸250μmol/L建立氧化损伤模型。用单细胞凝胶电泳分析小鼠肝细胞DNA损伤情况。观察到在肝细胞培养液中添加半胱胺150、300μmol/L能显著降低小鼠肝细胞氧化DNA拖尾百分率,提高细胞DNA损伤抑制率(由28.73%上升到63.33%)。结论:高脂日粮中添加半胱胺能显著提高肝脏的抗氧化能力,维持肝脏中脂肪代谢的稳定,降低血脂,减少腹腔脂肪的沉积。体外实验也表明,添加半胱胺能提高肝细胞的抗氧化能力,清除油酸诱导生成的自由基,保护肝细胞的DNA的完整性,提高ATPase活性。
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