促有丝分裂原蛋白激酶(MAPK)是细胞信号转导中枢,细胞外调节蛋白激酶(ERK)作为MAPK途径之一,它参与细胞增殖、分化,原癌基因转化、转移等过程。双特异性磷酸酶1(DUSP1)具有去磷酸化作用,通过脱磷酸来调节MAPK信号途径的活性,在细胞周期和细胞增殖方面发挥重要的调控作用。杆状病毒表达系统Bac-to-Bac技术是目前公认的最好最快的杆状病毒表达方法,它具有能容纳较大外源片段,加工完善表达产物,蛋白表达效率高,对人畜和环境无污染等优点。本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达双特异性磷酸酶1(DUSP1)基因,采用Ni柱亲和层析纯化及PBS透析DUSP1蛋白,通过SDSPAGE以及Western Blot鉴定,得到了真核表达的DUSP1蛋白。由于肿瘤细胞具有持续增值的特点,为了进一步研究DUSP1对肿瘤细胞的影响,分别在培养的六种肿瘤细胞(人肺癌细胞、人肝癌细胞、人胰腺癌细胞、人宫颈癌细胞、人乳腺癌细胞、人胃癌细胞)中加入DUSP1蛋白处理,在不同的时间点(0h,1h,2h,4h,6h.8h.)分别收集相应的肿瘤细胞,制备裂解液,以β-actin为内参进行Western Blot技术分析细胞中p-ERK含量的变化,发现在DUSP1蛋白作用后肿瘤细胞中的p-ERK含量在1h后明显降低。再利用DUSP1作用人宫颈癌细胞,在一定的时间段(Oh,12h,24h,36h,48h,60h,72h,84h,96h)收集细胞计数,绘制细胞的生长曲线来查看在DUSP1的影响下人宫颈癌细胞的生长情况,发现在60-72h时细胞增殖速度有受阻趋势。