三种植物蛋白替代鱼粉对珍珠龙胆石斑鱼生长、免疫及肠道健康的影响研究

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本论文以我国主要石斑鱼养殖品种——珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus♀×Epinephelus lanceolatus♂)为研究对象,分别探究花生饼(Peanut Cake,PNK)、玉米酒精糟(Corn Distillers Dried Grains with Solubles,DDGS)和玉米蛋白粉(Corn Gluten Meal,CGM)三种植物蛋白替代鱼粉对珍珠龙胆石斑鱼生长、免疫及肠道健康的影响。1、设置饲料鱼粉含量45%为对照组(P0),并利用PNK分别替代对照组中11%、22%、33%、44%、55%和66%(P1、P2、P3、P4、P5和P6)的鱼粉蛋白,配制成7种等氮等脂的实验饲料。设7个处理,4个重复,每个重复30尾鱼,选840尾均重(13.20±0.05)g体格均匀的珍珠龙胆石斑鱼幼鱼为实验对象,养殖8W。结果表明:P4、P5和P6组增重率(WGR)显著低于其余各组(P<0.05),然而饲料系数(FCR)和特定生长率(SGR)显著高于其他各组(P<0.05)。P0组全鱼水分含量和P4组粗脂肪(EE)含量均显著高于其他其他各组(P<0.05),P6组粗蛋白(CP)含量显著低于P0组(P<0.05)。血清总蛋白(TP)含量呈现先降低后升高的趋势,总胆固醇(TC)含量呈现逐渐降低的趋势且P0和P1组显著高于其他各组(P<0.05),P6组谷草转氨酶(AST)活性和总抗氧化能力(T-AOC)显著高于其他各组(P<0.05),P4组丙二醛(MDA)含量显著低于其余各组(P<0.05)。P4、P5和P6组胰蛋白酶(TPS)活性显著高于P0和P1组(P<0.05),而P5组和P6组脂肪酶(LPS)活性显著低于其他各组(P<0.05)。肝脏油红染色切片表明,随着饲料中PNK替代水平的升高,脂肪沉积逐渐加剧。菌群结果显示,门水平核心微生物菌群为变形菌门(Proteobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes);属水平,P4组有害菌发光杆菌属(Photobacterium)显著高于其余各组(P<0.05)。以增重率作为判断依据,饲料中PNK最适宜替代水平为21.94%。2、设置饲料鱼粉含量45%为对照组(D0),并利用DDGS分别替代对照组中6.67%、13.33%、20%、26.67%和33.33%(D1、D2、D3、D4和D5)的鱼粉蛋白,配制成6种等氮等脂的实验饲料。设6个处理,4个重复,每个重复30尾鱼,共选720尾均重(11.88±0.05)g体格均匀的珍珠龙胆石斑鱼幼鱼为实验对象,养殖8W。结果显示,DDGS替代FM对SR和FCR无显著影响(P>0.05),但D0、D1和D2组的WGR和SGR明显高于其余各组(P<0.05)。血清TG含量和ALT活性无明显差异(P>0.05),MDA含量呈逐渐下降趋势,D4和D5组明显低于其余各组(P<0.05)。随着替代水平提高,D3和D4组淀粉酶(AMS)活性明显低于其余各组(P<0.05),而LPS活性在D3组达到最大值,且明显高于其余各组(P<0.05)。随着替代水平提高,杯状细胞逐渐减少,D4和D5组的微绒毛严重受损且肠道皱襞高度(VH)显著低于其余各组(P<0.05),而皱襞宽度(VW)和肌层厚度(MT)无显著差异(P>0.05)。抗炎因子il-10和tgf-β1m RNA水平随着替代水平提高呈下降趋势,促炎因子tnf-α和il-1βm RNA水平随着替代水平提高呈上升趋势。D0组Ace和Chao指数显著高于D5组(P<0.05),但各组间simpson和shannon各组间无显著性差异(P>0.05)。以SGR为判断依据,饲料中DDGS的最佳替代水平为6.11%。3、设置饲料鱼粉含量45%为对照组(C0),并利用CGM分别替代对照组中11%、22%、33%、44%和55%(C1、C2、C3、C4和C5)鱼粉蛋白,配制成6种等氮等脂实验饲料。设6个处理,3个重复,每个重复30尾鱼,共选540尾均重(11.19±0.05)g,体格均匀的珍珠龙胆石斑鱼幼鱼为实验对象,养殖8W。结果显示,C4和C5组WGR和SR显著低于C0,C1和C 2组(P<0.05),C5组SGR显著低于C0、C1和C2组(P<0.05),各组间FCR无显著差异(P>0.05)。C0组血清TP含量显著高于其余各组(P<0.05),C0和C1组TC含量显著高于其余各组(P<0.05),C4和C5组AST活性显著低于其余各组(P<0.05)。C3组血清T-AOC能力显著高于其余各组(P<0.05),C0、C1和C2组MDA含量显著高于其余各组(P<0.05),C0组补体C4含量显著低于C3和C4组(P<0.05)。C1组肠道TPS活性显著低于其余各组(P<0.05),C0和C1组LPS活性显著低于其余各组(P<0.05),C3组AMS活性显著高于其余各组(P<0.05)。C0组VH显著高于其余各组(P<0.05),C0和C1组MT显著高于C3和C5组(P<0.05)。肠道epinecidin m RNA水平随着替代水平的增加先升高后降低,C2组显著高于C0组(P<0.05)。抗炎基因il-10和tgf-β1的m RNA水平均随着替代水平的增加先降低后升高,促炎基因tnf-α和il-1β的m RNA水平均随着替代水平的增加先升高后降低。以WGR为判断依据,饲料中CGM的最佳替代水平为9.35%。
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