自20世纪末转基因作物商业化种植以来，全球转基因作物累计种植面积已达到20亿公顷。中国政府对粮食作物转基因研发的战略是保证抗虫水稻、玉米、小麦等粮食作物转基因的研发力度，保持转基因水稻研发的国际领先地位。显然，对转基因作物检测方法的研究不但具有重要的理论意义，也具有十分重要的应用价值。　　环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification，LAMP)是一种设备要求简单、反应时间短、特异性高、灵敏度高的DNA检测技术。本研究以稻米中CP4-EPSPS基因为对象，建立了一种改良的基于环介导等温扩增技术的检测方法。在传统LAMP方法基础上，在扩增后的体系中加入SYBR GreenⅠ染料或在扩增体系中内掺入离子型染料HNB，使阳性检验结果发生颜色变化，实现了检测结果的肉眼直接判读。内掺HNB染料不影响扩增，可以有效地避免因开盖形成气溶胶污染实验室，造成后续结果假阳性率高的问题。为缩短检测的时间，本研究试验了用FTA卡提取水稻基因组DNA的方法，将提取时间缩短到20分钟，且不需要冷冻离心设备，实现了基因组DNA的现场快速提取。FTA卡提取水稻基因组DNA与LAMP相结合可以大大节省检测时间。　　本研究对LAMP反应体系进行了优化，试验的Mg2+终浓度为2mM、4mM、6mM、8mM、10mM和12mM，试验的dNTP浓度为0mM、0.2mM、0.4mM、0.6mM、0.8mM和1.0mM。以野生型粳稻受体品种TP309、转CP4-EPSPS基因水稻、转PMI基因水稻、转NPTⅡ基因水稻、转GUS基因水稻、转HPT基因水稻的基因组DNA为模板，通过外加SYBR GreenⅠ染料或内掺HNB染料，对LAMP扩增体系进行试验，筛选确定了特异性引物。用TP309水稻种子基因组10倍梯度稀释转CP4-EPSPS基因的水稻基因组DNA，试验的转基因成分浓度为单粒水稻种子基因组DNA的10-3、10-4、10-5和10-6，以各个稀释浓度基因组为模板，通过外加SYBR GreenⅠ染料或内掺HNB染料，对LAMP扩增体系进行试验，确定了LAMP方法的检出下限。优化后的外加SYBR GreenⅠ染料的反应条件为:Mg2+浓度4mM、dNTP浓度0.4mM，优化后的内掺HNB染料反应条件为:Mg2+浓度4mM、dNTP浓度0.6mM，扩增条件均为60℃反应60min，扩增结束后85℃变性10min。以野生型水稻TP309、转PMI基因水稻、转NPTⅡ基因水稻、转GUS基因水稻、转HPT基因水稻为模板进行试验，确定该反应体系能够特异性地扩增目的基因，将单粒水稻种子基因组10倍梯度稀释，确定反应检出下限为单粒水稻种子基因组DNA的10-5。　　本研究还比较了外加SYBR GreenⅠ染料或内掺HNB染料的LAMP方法的假阳性率，连续三天检测样品，确定内掺HNB染料的方法假阳性率为零，而外加SYBRGreenⅠ染料会出现假阳性结果。本研究推荐的用FTA卡提取水稻种子基因组DNA偶联LAMP的体系，使操作更为简便，可以满足现场快检要求，为大批量样品的快速检测奠定了初步的基础。可以预期，本研究所建立的改良的LAMP方法具有广泛的应用前景。