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乳腺癌是全世界范围内女性发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,HER2阳性表达的乳腺癌是乳腺癌中其中最重要的亚型之一。Kadcyla?(T-DM1)目前已经成为HER2阳性表达的乳腺癌二线治疗的首选药物。本研究以T-DM1为目标药物,对于自制的T-DM1药物B003与原研药Kadcyla?进行多批次的质量比对研究,初步建立了针对这种特殊抗体偶联药物的生物类似药的质量评价体系。分别从紫外法测定抗体药物偶联比(UV-DAR)、分子大小变异体(SEC-HPLC)、纯度(CE-SDS)、N,N-二甲基乙酰胺残留和游离小分子药物含量5个不同质量层面比对B003与原研药Kadcyla?的质量情况。根据生物类似药质量的评价原则,选取原研药平均值±3倍标准差设定质量范围。其中原研药Kadcyla?的UV-DAR范围为[3.1,3.7],非还原CE-SDS纯度范围为[94.6%,100%],游离小分子含量范围为[0.5%,1.1%],B003均落在Kadcyla?质量范围内。其中Kadcyla?SEC纯度为[98.2%,98.8%],还原CE-SDS纯度[90.1%,94.3%],部分批次B003的质量结果高于原研药Kadcyla?质量范围上限,纯度越高,质量越好。而N,N-二甲基乙酰胺残留部分批次高于原研药Kadcyla?,但是远低于中国药典的标准。接着我们利用超高效液相色谱串联四级飞行时间质谱(UPLC-ESI-Q-TOF),从完整分子、轻重链与肽段三个不同的水平深入表征T-DM1结构。脱糖后完整分子的层级分析,结果说明B003与原研药Kadcyla?在完整分子水平分子量具有高度一致性,药物的负荷曲线也与原研药Kadcyla?高度相似。轻重链分子量的层级分析数据显示,B003与原研药Kadcyla?轻、重链上载药状态基本一致。肽段水平上分析表明,总共确证的偶联位点是42个,其中轻链的偶联位点14个,重链的偶联位点28个。相比可能偶联的47个位点,确证了90%的位点。并且建立了偶联位点比例的检测方法,用来评价不同批次样品间的一致性,结果表明发现B003的批间一致性较好。