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MHV-68开放读码框52(Orf52)是一个在γ疱疹病毒中保守的基因，也是一个必需基因。间质蛋白ORF52在病毒的包装和释放过程中起作用，其缺失并不影响病毒基因组的复制，但会导致病毒颗粒无法释放到细胞外。从病毒感染的电镜图片上看，ORF52的缺失将导致病毒滞留在细胞质中，无法完成二次囊膜化而进入细胞内的囊泡，从而无法利用细胞的囊泡运输途径释放到细胞外。胶体金标记ORF52的电镜照片证实了ORF52与病毒的二次囊膜化及细胞的囊泡运输途径相关。根据间质蛋白ORF52的晶体结构，推测ORF52可以形成二聚体，免疫共沉淀实验证实了ORF52可以形成二聚体这个推论。ORF52内部包含5个在γ疱疹病毒中高度保守的位点，从晶体结构上看，其中四个(L20，E23，N24和L27)都位于ORF52N末端结构域α1螺旋上，另外一个(R95)很可能作为该蛋白的活性位点与其他蛋白进行相互作用。互补实验表明，N末端结构域α1螺旋删除和R95A点突变的ORF52使该蛋白完全丧失功能，但这两种突变体仍然能够形成二聚体。为了进一步搞清楚ORF52蛋白结构与功能的关系，我们构建了ORF52蛋白的点突变体L20A，E23A，N24A和L27A，研究发现这些点突变体均丧失功能，免疫荧光观察这些点突变体的定位，发现它们与野生型ORF52蛋白具有显著差别。由此我们得知N末端结构域α1螺旋与ORF52蛋白的正确定位密切相关。根据ORF52的晶体结构，可以推测位于ORF52蛋白中部的α2螺旋与二聚体的形成有关。据此我们构建了中部48-69位氨基酸缺失突变的ORF52，该缺失部位对应的结构域即为α2螺旋。实验结果表明该突变体不仅丧失了功能，也无法形成二聚体，但其定位正常。对间质蛋白相互作用的研究我们发现ORF52可以与间质蛋白ORF42发生相互作用。而R95A点突变的ORF52会丧失该相互作用。实验证明，MHV-68 ORF52不仅在序列上与人属γ疱疹病毒具有同源性，它们在功能上也是同源的。后续实验又发现与ORF52相互作用的间质蛋白ORF42也可以与宿主蛋白vps37c相互作用，而vps37c又是细胞囊泡运输系统的蛋白成分。由此我们将病毒的包装与宿主的囊泡运输途径联系了起来，为进一步探索病毒的包装过程提供了新思路。