松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus(Steiner and Buhrer1934)Nickle1970)引起松材线虫病，导致松树迅速枯萎死亡。要控制松材线虫病的蔓延，首先要尽早对病树作出正确诊断；而松材线虫的各种分子检测技术在检测时间、稳定性、精度等方面有着独特的优势，成为近年来的研究热点。本研究针对马尾松病木松材线虫分子诊断问题，通过研究松材线虫群体自身的分布规律以及探索松材线虫引诱剂β-月桂烯的应用，改变马尾松病木样本中局部的松材线虫数量；对现存的马尾松病木中松材线虫PCR检测体系进行了进一步验证和检测。主要取得了以下成果： 1、通过观察松材线虫在水中的分布状态，来研究松材线虫群体聚集与扩散趋势。发现：在一定密度内，松材线虫在水中能够由最初的随机分布到逐渐呈现聚集趋势，自发形成相对的聚集中心；在低密度时，则没有呈现这种聚集趋势；在高密度时，松材线虫会向周围扩散。因此，松材线虫群体在非干扰状态下的扩散和聚集趋势，由其群体密度决定。 2、系统地对β-月桂烯对松材线虫的引诱作用进行了研究，发现适当浓度的β-月桂烯在1％水琼脂中、盘多毛孢菌中和在松褐天牛虫孔中，均对松材线虫有引诱作用。20℃的条件下，利用10-2 mol/Lβ-月桂烯溶液在松褐天牛虫孔处进行引诱处理1.5h，能够使天牛虫孔周围线虫密度提高。松褐天牛虫孔周围线虫的数量及分布状态调查结果表明，以松褐天牛虫孔为中心的体积7cm×4cm×2cm的木块中，以南北轴为对称轴，虫孔两侧木头中的线虫数量，在P值为0.05的水平上，无显著差异。 3、从广州市南湖地区和华南农业大学校园内所采集的马尾松病木中，分离鉴定了4种真菌和10种细菌，分别是木霉属(Trichoderma spp.)、青霉属(Penicillium spp.)、炭疽菌(Colletotrichum spp.)和拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis spp.)四种真菌，以及蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus)、炭疽芽孢杆菌(B． anthracis)、短短芽孢杆菌、(Brevibacillus brevis)、苏云金芽孢杆菌(B．thuringiensis)、荧光假单孢菌(Pseudomamonas fluorescent)、枯草芽孢杆菌(B． subtilis)、肠杆菌属(Enterobacer spp.)、施氏葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus)、微杆菌(Microbacterium resistens)和解淀粉芽孢杆菌(B．amyloliquefaciens)十种细菌。 4、对松材线虫PCR检测体系的特性进行了研究。利用胡月清(2006)设计的松材线虫PCR引物，对上述真菌、细菌以及所随机挑选的100株细菌进行PCR扩增，没有获得松材线虫特异性扩增片断，进一步验证了引物的特异性。利用现存的马尾松病木松材线虫的PCR检测体系，对马尾松病木片直接进行PCR扩增，获得松材线虫的特异性片段，检测准确。对同线虫密度的马尾松病木片进行PCR扩增，其检测的重复性良好。将PCR反应液混和后分装，-20℃保存，2个月后仍能稳定检测松材线虫。 以上结果有利于建立马尾松病木中“松材线虫引诱-取样-染色-PCR检测”技术体系，为构建马尾松病木中松材线虫分子检测试剂盒打下基础，推进病木分子检测技术在生产实践中的应用。