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随着饲料业的发展,动物性蛋白源的不断枯竭与缺点日显,人们开始把目光投向其他蛋白源。豆粕,作为一种质量稳定的植物蛋白源,因其供应充足,氨基酸组成合理,含有异黄酮、脂肪酸、矿物质等生物活性物质及营养成分,日渐受到人们的青睐。然而,豆粕却有其自身的局限性:其一是,豆粕主要是由大分子蛋白构成,不能像小分子蛋白——寡肽和游离氨基酸那样被机体充分吸收。其二是,豆粕中含有多种抗营养因子,特别是其中的胰蛋白酶抑制因子和植酸含量最高,二者均在2%左右,它们不仅降低动物机体对营养物质的利用,也其影响健康。本研究分四步进行:首先,以透明圈法和福林酚法测定蛋白酶活力择优选出一株酶活力高的出发菌株;其次,进行紫外线诱变重在确定批量诱变的条件;再次,以蛋白酶活力、酸溶蛋白、游离氨基酸以及胰蛋白酶抑制因子和植酸含量为指标,筛选出经诱变可提高发酵豆粕中的小分子蛋白含量且降低抗营养因子作用的优良菌株并对其进行鉴定;最后,对所获的优良菌株加以效能验证。研究成果如下:1.对实验室保藏的5株产蛋白酶菌株,进行产蛋白酶活力高低的对比,最后择优选择一株酶活力较高的出发菌株。2.确定了紫外批量诱变的条件,即以30W紫外灯、照距15cm照射用稀释梯度为10-7的菌液涂布后的平板30s,该法稳定、可靠、重复性强。3.蛋白含量的测定,通过测菌株蛋白酶活力、发酵豆粕中的酸溶蛋白及游离氨基酸含量,筛选出了两株菌JY14、JY15。两株菌经抗营养因子含量的测定,即胰蛋白酶抑制因子及植酸含量,确定一菌株JY15,该菌株与出发菌株相比,上述各项测定指标均差异极显著(P<0.01)。对所获优良菌株JY15进行个体、群体、生理生化特征等生物学鉴定,确定该菌株为芽孢杆菌属。4.验证菌株遗传稳定性,并以酸溶蛋白含量为指标对其进行发酵带菌原料验证,确定该菌株在有杂菌存在的情况下仍然表现优异,该特点意味着所获优良菌株更能适应工厂的粗放式发酵。