层片状羟基磷灰石的结构调控及其转染与复合机制的研究

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天然层片状无机纳米材料及其插层复合材料凭借独特的二维层片状结构和优良的力学性能,在基因载体和复合材料领域得到了广泛关注。然而由于天然层片状无机纳米材料不具有生物活性且不能完全降解,因此制备出新型的二维层片状纳米材料具有重要的意义。本课题组前期通过模板法成功合成了具有层片状结构的羟基磷灰石(HAp),将HAp优良的生物相容性、生物活性和生物降解性与无机层片状纳米材料的结构优势相结合,并成功制备出磁性层片状HAp,致力于拓展HAp在基因载体和生物复合材料领域中的应用。本课题通过改变层片状HAp和磁性层片状HAp的制备工艺参数,进一步调节HAp的尺度与结构,实现层片状HAp与磁性层片状HAp的可控制备,探索二维片层结构对于转染效果的影响。通过X射线衍射(XRD)和透射电镜(TEM)对不同工艺参数下制备出的HAp的晶体结构和微观形貌进行表征。结果表明,对于HAp和磁性HAp,提高模板剂SDS用量和降低原料浓度均有利于得到良好的层片状结构。CCK-8测试结果证实,层片状HAp和磁性层片状HAp均具有良好的生物相容。以鲑鱼精DNA为模型DNA,考察了不同结构的HAp和磁性HAp对DNA的装载能力。紫外可见光光谱(UV-Vis)分析表明,在相同条件下,层片状结构良好的HAp和磁性HAp,其DNA装载量高。体外转染实验结果表明,层片状HAp与磁性层片状HAp比传统CaP载体的转染效率高。本课题组前期采用溶液插层技术成功制备了纳米层片状HAp/明胶复合材料和纳米层片状HAp/壳聚糖复合材料,其中增强相HAp与作为基体的明胶和壳聚糖均为水溶性的亲水材料,易于HAp在其中的分散与结合。为了进一步发挥纳米插层复合材料有利于增强相分散和界面结合好的特点,本课题制备了纳米层片状HAp/聚乳酸(PLA)复合材料。XRD结果显示,层片状HAp在1~10°范围内的衍射峰消失,表明其形成剥离结构;FTIR结果表明,层片状HAp和PLA之间存在氢键作用;SEM结果表明,层片状HAp在基体中呈“砖-水泥”结构;热失重(TG)测试、动态力学(DMA)测试和拉伸测试结果表明,与纯PLA相比,复合材料的热稳定性和力学性能均明显提高,且当HAp含量为20%,复合材料的各项性能最好。生物学测试结果证实,复合材料具有良好的生物相容性,能够为小鼠成纤维L929细胞的粘附、生长和增殖提供适宜场所。
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