论文部分内容阅读
目的:优化大鼠心脏不停跳体外循环模型及前路法大鼠右侧星状神经节阻滞模型的建立方法,探究星状神经节阻滞对大鼠体外循环后脑损伤的保护作用,以及其是否与Wnt5a/Ca2+信号通路及炎症反应相关。方法:通过随机数字表法将64只健康雄性SD大鼠(350 g~400 g)分为假手术组(B组)、星状神经节阻滞组(S组)、体外循环组(C组)和星状神经节阻滞加体外循环组(SC组)。通过大鼠右颈外静脉及右股动脉穿刺置管,与储血器、体外循环机、动物膜肺及相关管道连接成闭合回路,建立大鼠体外循环模型;前路法注射0.25%罗哌卡因0.25 ml建立大鼠星状神经节阻滞模型,出现霍纳综合征为成功标志。相关准备结束后,B组和S组观察2小时,C组和SC体外循环2小时。分别在实验开始即刻(T0)、实验开始1小时(T1)、实验开始2小时(T2)获取血清标本;在T2时过量麻醉法处死大鼠,获取大脑标本。采用Elisa法检测各时间点血浆IL-6、IL-10的浓度;蛋白质印迹法(western blot)检测大鼠海马区Wnt5a、p-Ca MKⅡ、PKC和NF-κB的蛋白表达,采用荧光定量PCR法检测大鼠海马区Wnt5a、frizzled-2、p-Ca MKⅡ和NF-κB的m RNA表达。结果:B组、S组的各项指标无统计学差异(P>0.05);与B组相比,C组和SC组血浆IL-6和IL-10的浓度在T1、T2时间点均有明显升高(P<0.05),T2时间点均高于T1(P<0.05);其中与C组相比,SC组血浆IL-6的浓度在T1和T2时间点均有所降低(P<0.05),IL-10血浆浓度在T1和T2时间点均有所升高(P<0.05)。与B组相比,C组、SC组海马区神经元的Wnt5a、p-Ca MKⅡ、PKC和NF-κB的蛋白表达量均升高(P<0.05);其中与C组相比,SC组大鼠海马神经元的Wnt5a、p-Ca MKⅡ和PKC的蛋白表达量均有降低(P<0.05),NF-κB的蛋白表达量无明显差异(P>0.05)。与B组相比,C组、SC组海马区神经元的Wnt5a、frizzled-2、p-Ca MKⅡ的m RNA表达量明显增加(P<0.05);其中与C组比较,SC组海马区神经元的Wnt5a、frizzled-2、p-Ca MKⅡ和NF-κB的m RNA表达量显明显减少(P<0.05)。结论:体外循环能会引起大鼠血浆炎症因子的增加、海马组织中Wnt5a/Ca2+信号通路中相关蛋白表达增强,这些均与大鼠脑损伤相关。星状神经节阻滞能有效减轻大鼠体外循环后脑损伤的严重程度,其保护作用可能与抑制Wnt5a/Ca2+通路、减轻神经元钙超载和抑制炎症反应有关。