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背景甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)是一种能够激活补体并促进调理吞噬作用的蛋白质。调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)是维持外周耐受的CD4+T细胞亚群。与MBL同为C型凝集素家族的肺表面活性蛋白A(surfactant protein A,SP-A)能够促进诱导性Tregs(iTregs)的表达。那么MBL是否同样促进调节iTregs的表达?是否对iTregs功能产生影响?至今仍不清楚。因此,深入研究MBL对Tregs诱导分化及功能影响,对阐明MBL在获得性免疫方面的新角色,具有重要意义。目的探讨MBL对调节性T细胞数目和功能的干预,为自身免疫性疾病和炎性疾病的治疗提供新思路方法1.Ficoll密度梯度离心法:采用Ficoll密度梯度离心法分离人脐血单个核细胞(CBMCs)和人外周血单个核细胞(PBMCs)。2.免疫磁珠分选法:采用免疫磁珠分选法从CBMCs中分选出CD4+CD25-T细胞;采用相同的方法分别从MBL诱导的CBMCs组和MBL诱导的CD4+CD25-T细胞组分选出CD4+CD25+T细胞(即iTregs)。3.流式细胞术(FCM)检测:分别收集新鲜提取的CMBCs、不同浓度MBL诱导的CBMCs、不同浓度MBL诱导的CD4+CD25-T细胞,检测诱导前后Foxp3的表达情况。4.RT-PCR法:分别收集不同浓度MBL诱导的CBMCs、不同浓度MBL诱导的CD4+CD25-T细胞,检测诱导前后Foxp3 mRNA的表达情况。5.CCK-8法:CCK-8法检测iTregs对PBMCs和CD4+CD25-T细胞增殖的影响。结果1.新鲜CBMCs中低表达Foxp3。2.MBL可以显著提高CBMCs中CD4+CD25+Foxp3+T细胞的比例。3.MBL促进CD4+CD25-T细胞向iTregs诱导分化。4.MBL不仅促进CBMCs中高表达Foxp3 m RNA,而且诱导CD4+CD25-T细胞高表达Foxp3 m RNA。5.iTregs不仅以浓度依赖方式抑制PBMCs的增殖,而且以浓度依赖的方式抑制CD4+CD25-T细胞的增殖。6.加入MBL后不仅增强iTregs对PBMCs增殖的抑制作用,而且增强iTregs对CD4+CD25-T细胞增殖的抑制作用。结论MBL不仅能够协同促进调节性T细胞的诱导分化,而且对调节性T细胞抑制效应T细胞的增殖具有一定的调控作用。