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目的本研究通过免疫组织化学及免疫组织化学双重染色的方法检测Musashi-1 (Msi-1)和P63在胎儿子宫内膜、育龄期正常子宫内膜、子宫内膜增生症及子宫内膜样腺癌(endometriod carcinoma, EC)组织的表达,初步探讨Msi-1和P63在人子宫内膜发育、育龄期子宫内膜生理性更新以及子宫内膜异常增殖过程中的作用,为子宫内膜干细胞标记物的筛选提供依据。方法本研究采用免疫组织化学SP法,对20例12-39周龄的胎儿子宫内膜、20例育龄期正常子宫内膜、40例子宫内膜增生症以及50例子宫内膜样腺癌组织中P63和Msi-1的表达进行检测;同时选取部分标本进行P63/Msi-1、P63/ER-α、Msi-1/ER-α免疫组织化学SP-SAP双重染色,分析各指标表达的特征。用SPSS13.0软件对数据进行统计分析。结果1 P63在人子宫内膜的表达:在胎儿子宫内膜,P63主要表达于上皮细胞,随胎龄的增加表达呈下降趋势;育龄期子宫内膜,仅1例增生期检测到P63阳性细胞(5%),阳性细胞数目稀少,零星分布于少量腺上皮的基底部;在子宫内膜样腺癌和子宫内膜增生症P63的阳性率分别是46%和50%,阳性细胞数量明显增多,与正常子宫内膜相比差别有显著性(P<0.05),子宫内膜样腺癌组织中,P63阳性细胞通常相对集中分布于肿瘤组织的某一区域的腺体或实性癌巢,尤其在鳞状分化区域可见较多的P63阳性细胞,基质中也有散在表达。子宫内膜增生症组织中P63的表达及分布与子宫内膜样腺癌相似,在部分增生症组织中P63阳性细胞的数量及染色强度高于子宫内膜样腺癌;P63在子宫内膜样腺癌和子宫内膜增生症组织的阳性率和阳性细胞百分率差别无显著性(P>0.05)。2 Msi-1在人子宫内膜的表达:在胎儿子宫内膜,Msi-1在上皮和基质均有表达,随胎龄的增加表达呈下降趋势;育龄期子宫内膜,有2例增生期和1例分泌期检测到Msi-1阳性细胞(15%),主要表达于基质,接近基质-肌层交界处,沿血管分布;子宫内膜样腺癌和子宫内膜增生症的阳性率分别是53%和67%,阳性细胞数目增多,与正常子宫内膜相比差别有显著性(P<0.05),阳性细胞分布于血管周围或腺体周围的基质、腺样结构及癌巢,单个或成群分布;Msi-1在子宫内膜样腺癌和子宫内膜增生症组织的阳性率和平均阳性细胞百分率差别无显著性(P>0.05)。3免疫组织化学双重染色结果:在子宫内膜增生症和子宫内膜样腺癌组织检测到P63/Msi-1双阳性细胞,平均阳性细胞百分率分别为1.04%±0.21%和3.12%±0.34%,其数量明显较同一标本的P63、Msi-1单阳性细胞少(P<0.05)。双阳性细胞主要分布于基质、癌巢周边部以及腺样结构基底部;同时检测P63/ER-α、Msi-1/ER-α双阳性细胞,P63/ER-a双阳性细胞在上皮组织稀少,零星分布于上皮下基底细胞;基质双阳性细胞相对较多;Msi-1/ER-α双阳性细胞主要分布于基质、癌巢的周边部和腺样组织基底部。结论1通过原位标记P63、Msi-1在人子宫内膜的表达,提示二者参与子宫内膜的正常和异常增殖过程;阳性细胞分布与预想的子宫内膜干细胞部位基本相符。2通过P63/Msi-1双重标记,结果提示在子宫内膜增生症及子宫内膜样腺癌组织中P63/Msi-1双阳性细胞数量更接近干细胞的阳性细胞率,提示双重或多重标记有利于干细胞的识别。3 P63/ER-α、Msi-1/ER-α双阳性细胞存在的部位与假定子宫内膜干细胞的龛盒结构基本一致,提示雌激素通过作用于龛盒结构调节子宫内膜干细胞的增殖。