激光辐射诱导水稻日本晴转座子mPing转座激活和可遗传DNA甲基化变异研究

来源 :东北师范大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:longfushen
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外源胁迫主要包括生物胁迫和非生物胁迫两种,它能给予生命体强大的进化选择压力,生命体主要通过产生相应的抵抗、适应、逃避等机制来生存。植物无法逃避,主要是通过短期内细胞生理水平变化、基因调控、和基因组重组来应对各种胁迫。转座子是基因组中可以移动和扩展的元件,在基因组中常常高度重复,是真核生物基因组的重要组成部分。近些年研究发现,在胁迫条件下植物通过细胞内siRNA量的变化以及DNA甲基化改变等表观遗传机制来影响转座子在植物基因组中的变化,进而导致基因组发生重组、基因表达发生变化。mPing是近年来在水稻基因组中分离的一种活跃的MITE类转座子,它能在组织培养、γ射线等非生物胁迫条件下发生转座。本实验室通过激光辐射处理水稻栽培品种JL01-124证实,激光辐射能够诱导该水稻中的mPing发生跳出,基因组的甲基化发生改变。本文是在该实验的基础上,进一步采用模式生物日本晴实验得到的结论。本文发现,通过激光辐射处理水稻日本晴的糙米种胚,产生很多的表型变异单株。筛选当代的表型变异明显的单株,通过Southern杂交和特殊位点PCR方法检测变异单株及其自交后代M1和M2的转座子mPing和Pong的变化,同时检测了M1与日本晴杂交后代的变化。结果证明:激光辐射能够诱导水稻日本晴转座子mPing的跳出并插入新位点,并能通过减数分裂在M1、M2后代中稳定遗传;激光辐射同时还诱导了Pong的激活,也稳定传递给后代;M1与日本晴杂交的后代中mPing没有新的插入和跳出位点,后代与日本晴相同。本文还对当代变异株及其后代的DNA甲基化的变异进行了Southern检测分析,发现大部分基因与转座子发生了CCGG位点甲基化变异并且能够稳定遗传给后代,少部分后代单株甲基化发生了回复突变,也有的单株发生了进一步的变异。
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