背景：急性呼吸窘迫综合征（Acute respiratory distress syndrome, ARDS）是由心源性以外的各种肺内、外致病因素导致的急性、进行性呼吸衰竭，由于缺乏特异有效的治疗方法，其病死率仍然高达36％－44%。肺部进行性纤维增殖的发生是影响ARDS患者抢救成功率及预后的主要因素。即便是幸存者，也会由于肺纤维化发生而遗留不同程度的肺功能损害和运动能力下降。因此，ARDS的肺纤维化进程及其发生机制是ARDS研究的重要方向。机械通气是ARDS患者重要的治疗手段之一，机械通气给予患者重要生命支持的同时，不适当的机械通气会引发或加重肺损伤。然而机械通气对ARDS相关的纤维化发生的影响一直未被重视。过度的机械牵张会引起肺上皮损伤，持续的上皮损伤可以导致病理性修复甚至纤维化发生。同时越来越多研究表明肌成母纤维细胞作为调节肺纤维化进程的关键细胞，其主要激活方式是通过局部上皮间质转化（Epithelial to mesenchymal transition,EMT）过程实现。因此本实验以人肺上皮细胞为研究对象，通过体外试验研究机械牵张对人肺上皮细胞EMT的影响及其可能机制，探讨机械通气在ARDS相关的肺间质纤维化进程中的作用。　　目的：研究不同条件的机械牵张对人肺上皮细胞BEAS-2B向间质转分化的作用，从体外水平探讨机械通气在急性呼吸窘迫综合症相关肺纤维化中的作用及可能存在的机制。　　方法：模拟气管内滴入盐酸的ARDS动物模型方法，牵张前对体外培养的BEAS-2B细胞用0.1N HCl进行预刺激（培养液PH=4.0）30min，同时用PBS处理作为对照。应用FX-5000细胞牵张加载系统对处理后细胞施加不同条件的牵张刺激：10%，20%牵张应力分别牵张24h，48h和72h，频率0.33Hz。实验分组：对照组；PBS+10%牵张组；PBS+20%牵张组；HCl组；HCl+10%牵张组；HCl+20%牵张组。相差显微镜下观察细胞形态变化，采用RT-qPCR、Western blot和免疫荧光方法分别检测E-cadherin、Cytokeratin-8、α-SMA、Vimentin、TGF-β1、ACE2以及Midkine mRNA和蛋白的表达。应用Lipofectmine2000将Midkine siRNA转染BEAS-2B细胞后施加20%牵张应力48h，Westem blot观察沉默Midkine表达对上述各指标表达的影响。　　结果：⑴BEAS-2B细胞受到20%牵张48h及72h均可观察到EMT改变，表现为细胞形态由鹅卵圆形变为长梭样，细胞间隙明显增宽；上皮标志物E-cadherin，Cytokeratin-8表达较对照组明显下调，α-SMA，Vimentin及TGF-β1表达上调（p<0.05）；细胞予以10%牵张后其EMT相关指标变化不明显，差异无统计学意义。⑵予以HCl预处理后行20%牵张在24h时出现上述改变；予HCl预处理后行10%牵张，牵张72h后可观察到EMT改变。⑶BEAS-2B细胞受到20%牵张48h后Midkine表达出现上调。⑷沉默Midkine表达后可以部分抑制过度牵张诱导的细胞α-SMA，Vimentin上调表达，逆转E-cadherin、Cytokeratin-8蛋白的下调表达。　　结论：过度机械牵张可通过激活Midkine表达诱导人肺上皮细胞 BEAS-2B发生 EMT改变；HCl预处理可以加强牵张诱导EMT的作用。Midkine介导过度牵张诱导EMT这一过程可能参与促进ARDS晚期纤维化病理进程。