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研究背景急性肺损伤是常见于ICU的临床综合征,并导致较高的死亡率。它常常发生在sepsis患者中。在脓毒症导致的急性肺损伤的发病过程中,微血管渗漏,以及肺水肿,能够加重疾病的严重程度。在这个过程中,一个显著的特征是血管内皮细胞屏障的破坏,通透性增高。内皮细胞之间的紧密连接和细胞粘附在内皮屏障中起着重要的作用,很多研究者针对细胞连接,发现了很多重要的信号通路,以及改善通透性的药物,但是在严重的肺损伤中,不仅是细胞连接遭到破坏,内皮细胞本身的损伤或者凋亡也会导致通透性增加。因此保护内皮细胞免受损伤,是降低通透性的一项基础的手段。一种cytohesin Arf-GEFs的抑制剂,secinH3,通过阻断Arf6的激活,从而增强了细胞之间的连接。但是SecinH3对内皮细胞是否有保护作用,则没有文献报道,因此,在本文中,我们在小鼠脓毒症导致肺损伤的模型中,应用cytohesion的抑制剂,secinH3,来治疗脓毒症导致的肺损伤,观察他是否对内皮细胞有保护作用,以及它对血管通透性以及肺损伤的影响。研究方法小鼠分成2组,假手术组和CLP组,研究CLP导致的脓毒症对肺的影响,以确定CLP导致肺损伤的模型的效果。观察小鼠的一般情况,血气分析,肺的顺应性,以及肺的病理切片,和死亡率。2小鼠随机分成4组：假手术组,CLP组,SecinH3低剂量组,SecinH3高剂量组。以确定SecinH3是否能降低通透性,减轻肺水肿。观察制表位：小鼠血气分析,肺的顺应性,以及肺的病理切片,和死亡率。蛋白,细胞,水分的泄露的情况。以及肺内的促炎因子的水平。3.上述四个组在术后24小时取材后检测肺脏的内皮细胞的状态,透射电镜和血液中vWF的水平。超氧化物歧化酶,丙二醛等氧化应激的指标,同时检测Nrf-2的表达。在体外培养人脐静脉内皮细胞,用LPS作为损伤因素,研究SecinH3对LPS处理的内皮细胞的影响,流式细胞术检测细胞的凋亡。并且在体内和体外研究用SOD的抑制剂DDC研究SecinH3的作用。结果1.CLP术后,小鼠的呼吸功能,肺的顺应性大幅恶化。死亡率大幅增加,肺的HE染色显示,CLP术后,小鼠的肺内病理损伤严重,肺泡腔内渗出大量的细胞。肺泡间隔增宽。2.在CLP导致的肺损伤模型中,SecinH3可以提高了术后小鼠的肺呼吸功能,小鼠的血气和顺应性都得到改善,并且肺的病理切片也得到了改善。肺的白细胞,全细胞渗出,以及湿干比。促炎因子的检测表明：肺内的TNF和IL-6没有下降。3.在术后肺的电镜显示：小鼠肺脏的内皮细胞的内皮细胞在CLP术后,肿胀严重。但是SecinH3可以改善内皮细胞的肿,保护内皮屏障。在SecinH3使用后,血液中vWF的水平也出现大幅下降。进一步的研究表明,SecinH3可以增加SOD的活性,减轻MDA的量。减少了内皮细胞的凋亡。免疫印迹实验表明：SecinH3是通过增强Nrf-2的表达从起到减轻氧化应激的效果,Nrf-2是抗氧化中的重要的因子。SOD的抑制剂DDC的实验证明：DDC可以阻断SecinH3的抗氧化作用。结论1.CLP模型可以导致急性肺损伤,该损伤模型对肺的大体功能和微观病理都有较大的影响,是较好的肺损伤的模型。2.SecinH3可以减轻急性肺损伤后的细胞渗出蛋白渗出以及肺水肿,降低肺的通透性。但是不能减低肺内促炎因子的水平。3.SecinH3通过调节Nrf-2的表达,增加SOD的活性,减轻了氧化应激,从而保护了内皮细胞,减少了内皮细胞的凋亡。