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目的:肾母细胞瘤(Nephroblastoma),又称Wilm’s瘤,是小儿最常见的泌尿系恶性肿瘤,约占小儿实体瘤的8%。由于手术、化疗及放疗等措施的综合应用,肾母细胞瘤的死亡率大大降低。然而,化疗及放疗也给成长中的儿童带来了许多严重的并发症,如脏器损害、生长延迟、生殖障碍,甚至继发第二肿瘤等。所以,应当准确地判断肿瘤的预后,减少不必要的治疗或降低治疗强度。传统的根据肿瘤的组织学类型及临床分期判断预后的方法有很大程度的不可靠性,有的分期早、无淋巴结转移的非间变型肾母细胞瘤却预后不佳。从分子生物学角度探索肿瘤预后标志物是当前研究的热点。 Survivin是近来发现的一种新的抗凋亡因子,是凋亡蛋白抑制因子(inhibitor of apoptosis protein,IAP)家族的成员,其在肿瘤中的过度表达可克服凋亡的关卡(checkpoint),通过有丝分裂促进转化细胞的异常增殖。Survivin也与细胞周期调节因子CDK4结合,使P21从与CDK4结合的复合物中释放出来,与线粒体procaspase3相互作用,从而抑制fas介导的细胞死亡。Survivin参与了血管形成过程,是血管形成中生长因子诱导的保护性基因,维持血管内皮细胞的正常增殖。病理情况下,Survivin表达于大多数恶性肿瘤,在肿瘤的发病机制中有重要作用。已有研究表明Survivin在癌组织中的表达与恶性肿瘤的侵袭性及预后有关。 Fas,即CD95,是一个48KD的Ⅰ型膜蛋白分子,属于肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)受体超家族成员。人的Fas基因位于10号染色体,Fas多肽有319个氨基酸组成,由于Fas具有诱导凋亡的能力,并通过死亡域间作用促进Fas聚合而传导死亡信号,因此又称死亡分子。Fas配体(FasL)为TNF相关的Ⅱ型跨膜蛋白,分子量为40KD,Fas与FasL结合或与抗体交联可启动Fas阳性细胞的死亡信号,导致细胞凋亡,主要负责那些发生快速变化的细胞群扩增的限制,是机体内源性平衡的一部分。研究中发现,大多数良性肿瘤如结肠腺瘤,纤维瘤等,Fas表达类似于其来源的正常组织,而恶性肿瘤的Fas表达明显下调或丢失,逃避体内Fas系统对其的清除作用。 本试验应用免疫组织化学方法检测survivin、fas蛋白在肾母细胞瘤中的表达中文摘要情况,研究它们与发病年龄、临床分期、组织类型、不同预后之间的关系,探讨它们在肾母细胞瘤发生发展中的作用,从而为肾母细胞瘤预后判断及治疗方案的制定提供依据。 材料和方法:30例肾母细胞瘤石蜡包埋标本取自青岛大学医学院病理科1992一2002年病理档案,术前均未化疗。其中男18例,女12例;年龄5月一9岁,小于3岁者13例,3岁以上者17例;NWTS一31临床分期:I期10例、11期8例、111期8例、IV4例。组织分型:上皮型8例、间叶型4例、胚芽型7例、混合型5例、间变型6例。转移组8例:肺转移4例、肾门及腹膜后淋巴结转移各2例。随访2年以上者25例,4例因肿瘤广泛转移死亡。正常对照巧例,取自肿瘤旁正常肾组织。应用免疫组化方法检测检测S盯vivin、fas蛋白在上述标本中的表达。试剂:兔抗人survivin多克隆抗体、兔抗人fas免疫组化试剂盒均由武汉博士德生物工程有限公司提供。染色方法:过氧化物酶SABC法,DAB显色,染色步骤按说明书进行。统计分析用卡方检验及相关分析。 结果:Survivin蛋白在肾母细胞瘤中的表达率为53.3%,高于正常肾组织0.0%;Fas蛋白在肾母细胞瘤中的表达率为36.6%,低于正常肾组织的80.0%;二者均有统计学意义。Survivin及Fas蛋白在小于3岁及3岁以上年龄组之间的表达未见明显差异。Survivin蛋白在UH组及FH组的表达率分别为83.3%、45.8%,在晚期及早期病例组中的表达率分别为83.3%、33.3%,在有转移组与无转移组之间的表达率分别为87.5%、40.9%,差别有统计学意义。Fas蛋白在临床分期及病理分型之间表达的差别无统计学意义。Survivin蛋白阳性者2年生存率为69.2%,明显低于Survivin蛋白表达阴性者,后者2年生存率为100%(P<0.05)。 结论:本研究发现小儿肾母细胞瘤组织中存在Survivin蛋白的高表达及FaS蛋白的低表达,说明二者协同参与了肾母细胞瘤的发生;Survivin阳性率与肿瘤的临床分期及病理类型相关,说明Survivin的高表达与肾母细胞瘤的进展有关;本组资料还提示,Survivin蛋白阳性者2年生存率明显低于Survivin表达阴性者(P<0.05),说明Survivin可以作为肾母细胞瘤预后的重要指标。