三黄烧伤灵对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜影响的实验研究

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目的构建耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcu saureus,MRSA)生物膜体外模型,探索三黄烧伤灵与黄芩对其生物膜的影响。方法构建MRSA生物膜体外模型:全自动细菌分析仪及纸片扩散法确定为MRSA,应用阿里新蓝-刚果红染色定性MRSA生物膜,以聚氯乙烯薄片为载体,96孔板培养建立MRSA生物膜体外模型。利用扫描电镜观察生物膜形成过程,应用结晶紫生物膜半定量,分别在培养1d,3d,5d分析其形成生物膜的能力,于建模第3天(成熟生物膜)应用孔板微量稀释法测定黄芩、三黄烧伤灵萃取物对临床MRSA的MIC值。药物作用24小时后,采用扫描电镜观察黄芩、三黄烧伤灵萃取物对成熟耐MRSA生物膜的作用效果。结果阿里新兰-刚果红染色结果与扫描电镜及半定量阳性率均为100%,酶标仪结晶紫半定量及扫描电镜观察显示MRSA生物膜于培养第1d即出现,第3d及第5d稳定,含黄芩(425)μg的三黄烧伤灵萃取物与(2048)μ g黄芩即可对成熟(?)RSA生物破坏。结论阿里新兰-刚果红染色是对生物膜定性的快速、准确的方法;三黄烧伤灵可有效破坏MRSA生物膜,较之单味中药黄芩有明显优势,不但可以更有效的破坏生物膜,并可较好的杀灭游离菌。
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