【背景】肿瘤的发生发展与肿瘤细胞所处的内外环境有密切的关系。1971年Folkman等首次提出肿瘤能够促进血管生成，并且生成的血管提供肿瘤生长所需的营养物质，从此一系列研究揭示了肿瘤与血管的关系，想通过抑制肿瘤血管生成来治疗肿瘤。淋巴管转移是肿瘤转移的主要方式之一，许多肿瘤自身可以分泌一些分子例如VEGF-C或者VEGF-D等，促进肿瘤中淋巴管再生。神经常与血管、淋巴管在体内相伴行，类似于血管生成和淋巴管新生一些研究显示肿瘤中可能也有神经新生；精神心理因素与肿瘤的发生发展密切相关，患抑郁症、应激等症的患者肿瘤患病率比普通人群高。研究证实，多种恶性肿瘤组织中有神经纤维的分布，但是肿瘤与神经纤维之间相互作用关系目前尚不清楚。【目的】1.建立肿瘤与神经三维共培养模型，为后续实验提供平台。2.体外研究肿瘤与神经相互作用的形态学表现，为揭示肿瘤与神经的相互影响提供依据。3.比较食管癌神经周浸润的两种检测方法，为临床统一诊断方法提供支持；分析食管鳞癌的神经周浸润与患者临床病理关系。【方法】1.采用原代分离培养的方法，提取大鼠的背根神经节；用慢病毒转染绿色荧光蛋白于食管癌细胞系EC109，Matrigel包被背根节和食管癌EC109细胞进行三维共培养。2.利用肿瘤细胞与神经混合培养法和三维共培养法，观察食管癌细胞与神经生长之间的相互作用，计算神经轴突生长的数目与面积，观察神经节对肿瘤细胞的形态学影响以及肿瘤细胞沿神经迁移的神经周浸润现象。采用实时定量PCR检测食管癌细胞系EC109和EC9706中神经生长因子（NGF）和脑源性神经生长因子（BDNF）的表达。3.分别运用HE染色和神经元特异性抗体S100免疫组织化学法，共同评价126例食管鳞癌标本中神经周浸润的水平，分析两种方法的优缺点；分析神经周食管癌细胞浸润与患者的临床病理关系。【结果】1.成功地建立了食管癌细胞系与大鼠的背根神经节体外三维共培养模型，为进一步实验提供了良好的研究平台。2.食管癌细胞与背根节细胞混合普通培养，背根节发出的轴突靶向肿瘤细胞生长。食管癌细胞与背根节组织三维共培养，面向肿瘤细胞侧背根节组织长出的轴突较长、较浓密，背对肿瘤细胞侧的轴突则较短、较稀疏；共培养第4天，面向肿瘤侧与背对侧神经纤维的数目分别为28和7个，面向肿瘤侧与背对侧神经纤维面积分别为109μm2和42μm2；共培养第7天，面向肿瘤侧神经轴突的数目与面积分别为87个和346μm2，背对侧分别为23个和141μm2，差异均有统计学意义（P<0.05）。PCR检测发现，NGF和BDNF表达于食管癌细胞。另外三维共培养发现，面向神经侧的肿瘤细胞形成突起样结构向神经节方向迁移，而背侧并没有出现此现象；第7天时，可见肿瘤细胞增殖明显，并向着DRG方向凸起性的生长；第9天时，神经轴突与肿瘤细胞接触后，肿瘤细胞沿着轴突进行迁移；第11天时，沿着神经纤维迁移的肿瘤细胞数量明显增多，肿瘤细胞集落边缘更加不规则。3.S100组化染色法与HE染色法相比，S100染色法能够清晰显示HE染色法很难确定的神经周浸润。HE染色判断126例食管癌患者神经周浸润的发生率为28.57%，而S100染色判断同一研究对象神经周浸润的发生率为51.59%。配对样本卡方检验P<0.01、一致性度量Kapaa=0.483，有统计学意义，两种检测方法效果差别显著。食管癌的神经周浸润与患者的肿瘤大小（P=0.001）、AJCC分期(P<0.001)、T分期(P<0.01)以及肿瘤血管侵犯(P=0.07)有统计学意义，与年龄、性别、组织分化程度、肿瘤位置、疼痛等未发现有统计学意义。【结论】食管癌与神经之间具有相互促进作用。食管癌细胞可以导向神经轴突向其生长，并且食管癌对神经轴突的生长具有促进作用；神经可以对食管癌细胞的增殖等生物学行为产生影响，并且食管癌细胞可以沿着神经纤维逆行向神经元方向迁移，即神经周浸润。S100免疫组化染色法比HE染色法对神经周浸润的判断更加准确，食管癌的神经周浸润可能在食管癌的发生发展中起到重要作用。